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dcvacluca联合培美曲塞卡铂治疗期非小细胞肺癌的安全性评价 肺癌是中国的一种常见恶性疾病之一。其中，非小细胞肺癌（iuc）约占肺癌的85%，许多患者在治疗过程中处于晚期（iii期）。 DCVAC/Lu Ca是一种自体活化细胞免疫治疗, 由负载NSCLC抗原 (H520和H522细胞株全抗原, 如Her2/neu、MAGE-A3和Survivin等) 的DC组成。传统的化疗在杀伤肿瘤细胞的同时也消耗了机体的T细胞, 而DCVAC/Lu Ca可诱导包括细胞毒CD8 1 对象和方法 1.1 病例选择及排除标准 选取来自上海交通大学附属胸科医院2016年1—12月的20例组织学或细胞学检测首次被证实为Ⅳ期、非鳞性、EGFR野生型、ALK阴性的NSCLC患者。入组患者的病理类型均为腺癌, 获取病理标本的方式为气管镜、超声支气管镜或经皮肺穿刺。患者的东部肿瘤协作组 (eastern cooperative oncology group, ECOG) 评分0~1分, 并且治疗前未进行过针对NSCLC的全身性治疗。 患者排除标准: (1) 已知活动性/未经治疗的中枢神经系统转移。 (2) 任何已知的原发性免疫缺陷。 (3) 需要长期进行类固醇治疗或免疫治疗。 (4) 人类免疫缺陷病毒 (HIV) 阳性、活动性乙型肝炎或丙型肝炎、梅毒。 (5) 有其他恶性肿瘤史或同时伴有其他恶性肿瘤。 (6) 并发心血管疾病。 (7) 活动性重度感染或其他严重并发症。 (8) 在入组前4周内使用过任何试验性治疗。 (9) 怀孕或哺乳期妇女。 (10) 对培美曲塞、卡铂及其成分、DCVAV/Lu Ca成分严重过敏。 本研究获上海交通大学附属胸科医院伦理委员会批准, 所有患者均签署知情同意书并遵从研究方案。 1.2 患者年龄性别分布 将入组患者随机分为试验组 (n=10) 和对照组 (n=10) 。试验组患者年龄41.0~74.0岁, 中位年龄61.0岁, 平均年龄59.6岁;男性6例, 女性4例。对照组患者年龄34.0~72.0岁, 中位年龄61.0岁, 平均年龄58.6岁;男性8例, 女性2例。ECOG评分皆为1。 1.3 治疗方法 1.3.1 标准化疗 该治疗分为诱导化疗期和维持化疗期。在诱导化疗期, 每个化疗周期的第1日应用如下方案:培美曲塞500 mg/m 1.3.2 细胞培养和细胞grop系对dc 采用美国COBE Spectra血细胞分离机, 于1周内对试验组患者进行外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cell, PBMC) 采集。采血时间为120~180 min, 获得40~150 m L PBMC悬液;选择贴壁单核细胞, 培养于含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF) (500 U/m L, Gentaur) 和白介素4 (interleukin-4, IL-4) (20 ng/m L, Gentaur) 的Cell Gro培养基, 每3 d换液1次, 第6日获得未成熟DC。将死亡的肿瘤细胞系H520和H522按照1:1的比例混合后用200 MPa高静水压 (high hydrostatic pressure, HHP) 1.3.3 cdvac/luca在体内生长的表达 本研究对死亡的肿瘤细胞及DCVAC/Lu Ca进行质量控制。 (1) 死亡肿瘤细胞的质量控制通过流式细胞术检测冻存的HHP处理后的肿瘤细胞的免疫原性细胞死亡标志物 (HSP70、HSP90、钙网蛋白) 的表达, 并通过克隆形成实验确定每批产品中不存在任何有生长能力的肿瘤细胞。 (2) DCVAC/Lu Ca的质量控制显微镜和流式细胞仪检测起始物料 (白细胞单采产品) 和中间体 (纯化的单核细胞、冲击前未成熟DC和冻存前成熟DC) 的质量。倒置显微镜计数DC并观察增殖情况及有无污染。流式细胞术评估DC百分比和成活率, CD80成熟标志物的表达, 游离肿瘤细胞的百分比, 活的T细胞、B细胞、自然杀伤 (natural killer, NK) 细胞和细胞碎片的百分比。 研究需确保细胞制品中细菌、真菌、内毒素皆为阴性后方可回输给患者。回输前需再次进行细胞活性检测, 首次回输的细胞成活率95%。 1.4 评估指标 1.4.1 肿瘤进展评价 试验组在DCVAC/Lu Ca治疗30~40 d后评估疗效。根据实体肿瘤疗效评估标准 (response evaluation criteria in solid tumors, RECIST) 版本1.1评价肿瘤进展, 包括完全缓解 (complete response, CR) 、部分缓解