有机实验12----柱层析硝基苯偶氮苯.pdfVIP

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柱层析(12) 一、 实验目的: 掌握柱层析的基本操作技能,通过柱层析进一步理解层析法分离,提纯有机化合物的 基本原理。 二、 实验原理: 色谱法是分离、纯化、鉴定有机化合物的重要方法,也可以检测反应进展 情况。其原理是利用混合物中各组分在某一物质(如硅胶)中的吸附、溶解 性能(分配)的不同,或亲和能力的差异,使得混合溶液流经此物质的过程 中,经过反复的吸附或分配等作用,从而将各组分分开。可分为吸附色谱、 分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱;也可根据操作不同分为薄层色谱、柱 色谱、纸色谱、气相色谱、高压液相色谱等 三、 实验仪器:Al O , 石油醚,乙酸乙酯,无水乙醇,偶氮苯、邻硝基苯胺 2 3 (1:1)混合物,棉花,层析柱,三角瓶,量筒,薄层层析板。 四、 基本概念: (1)Rf 值=化合物移动距离/展开剂移动距离 (2 )硅胶H; G; GF ; HF 的含义 254 254 (3 )步骤:硅胶板的制备→点样→配展开剂→展开→显色→计算Rf 值 (4 )洗脱剂的极性大小 五、实验步骤: 装柱(棉花,2ml 石油醚,5g Al O 于10ml 石油醚中,倒入层析柱)→ 2 3 加样 (滴入混合物)→洗脱 (石油醚:乙酸乙酯20:1,接收色带,换乙醇 作洗脱液,接收邻硝基苯胺)→薄层析层(石油醚:乙酸乙酯 20:1,计算 偶氮苯及邻硝基苯胺的Rf值。) 六、思考题: (1) 硅胶H; G; GF ; HF 的含义? 254 254 (2 ) 本实验分离两个化合物的依据是什么? (3 ) 若柱中留有气泡或填充不均匀,会怎样影响分离效果?如何避免?

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