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清肠温中方对dss诱导uc模型小鼠h1h2平衡的干预作用 溃疡性胃炎（iu）是一种非特异性炎症疾病，可于结节直肠粘膜和粘膜下层。这是炎症最重要的类型之一。临床上以腹泻、黏液脓血便、里急后重等肠道表现为主, 同时可能伴有营养不良、焦虑抑郁或多系统不同的肠外表现, 病情严重者甚至出现威胁生命的情况。UC的发病机制目前尚不明确, 多数观点认为是由于环境、感染等因素刺激, 引起遗传易感的宿主发生不恰当的免疫炎症反应从而发病 1 材料和方法 1.1 实验动物与设备 SPF级健康雄性BALB/c小鼠90只, 体质量 (20±2) g, 购自北京维通利华实验动物技术有限公司, 许可证号:SCXK (京) 2016-0011, 饲养于北京中医药大学SPF级动物房, 12 h光照/12 h黑夜循环, 温度 (22±2) ℃, 湿度50%~60%, 自由饮食饮水。 1.2 试剂及试剂 清肠温中浸膏方 (黄连6 g, 炮姜10g, 三七6 g, 木香6 g, 炙甘草6 g等) 由北京中医药大学中药学院提供;阳性对照药美沙拉嗪缓释颗粒 (艾迪莎, 国药准字 购自北京中医药大学东方医院外购药房;葡聚糖硫酸钠 (DDS, 160110, 相对分子质量36000~50000) 购自美国MP Bio公司;便潜血试剂盒 (中国珠海, BA-0202B) 、4%多聚甲醛 (SL1830) 购自中农博信 (北京) 科技有限公司;小鼠IL-1β (EK0394) 、IL-4 (EK0405) 、IL-5 (EK0408) 、IL-6 (EK0411) 、TNF-α (EK0527) 酶联免疫吸附ELISA试剂盒均购于武汉博士德生物工程有限公司;抗NF-κB p50 (ab28849) 抗体购自美国Abcam公司。 1.3 给药剂量及给药剂量 BALB/c小鼠适应性饲养1周, 采用随机数字表法将90只小鼠随机分为空白组、模型组、清肠温中方高剂量组 (3.2 g浸膏/kg, 临床患者2倍用药量) 、清肠温中方中剂量组 (1.6 g浸膏/kg, 临床患者正常用药量) 、清肠温中低剂量组 (0.8 g浸膏/kg, 临床患者0.5倍用药量) 和美沙拉嗪组 (606.7 mg/kg, 临床患者正常用药量) 共6组, 每组15只, 结合文献[3]和临床患者用药量确定给药剂量。采用改良的自由饮用3% (w/v) DSS方法复制慢性UC模型 1.4 样品的采集和检测 1) 疾病活动指数 (DAI) 1.5 统计学处理方法 应用SPSS22.0统计软件。符合正态分布的计量资料用 (ue0af±s) 描述, 用单因素方差分析进行检验, 方差齐用LSD检验, 不齐用T 2 结果 2.1 小鼠一般情况 见表1。随着饮用DSS溶液时间的延长, 小鼠出现腹泻、黏液脓便、甚至肉眼血便的症状加重, 同时伴有体质量逐渐减轻, 且症状在饮用药物3 d后明显加重。在造模第1周期内小鼠症状表现明显, 病情严重, 每组均有死亡现象发生, 后2个周期的症状表现较前均有所减轻, 死亡数量也较前减少。药物干预后除模型组外, 各组小鼠便血、腹泻症状有不同程度减轻, 体质量逐渐恢复并增加, 实验终点DAI评分结果提示模型组疾病程度明显重于空白组 (P0.01) , 清肠温中方和美沙拉嗪干预后的评分均有所降低 (P0.05) 。 2.2 il-4和il-5的情况 见表2。与空白组比较, 模型组小鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β明显升高 (P0.01) , IL-4和IL-5明显减少 (P0.01) 。药物干预后各组与模型组相比, 清肠温中方各剂量和美沙拉嗪均能降低TNF-α、IL-6和IL-1β (P0.05) 并增加IL-4和IL-5 (P0.05) , 其中以清肠温中方中剂量组和美沙拉嗪组作用最明显。 2.3 肠道结构紊乱的表达 见表3, 图1。小鼠结肠组织免疫组化染色后发现, 空白组结肠组织表达极少量NF-κB p50蛋白, 且表达位置主要位于细胞质;模型组在肠道结构紊乱消失的基础上, 与空白组比较表达明显增多 (P0.01) , 且表达位置主要位于细胞核。药物干预后, 与模型组相比, 清肠温中方高、中剂量和美沙拉嗪组均能减少NF-κB p50蛋白表达 (P0.05) , 表达位置在细胞质中为主, 其中以中剂量组和美沙拉嗪组的效果最为明显。 3 不同的细胞因子 本研究采用反复饮用DSS溶液复制慢性UC模型, 其中DSS诱导的化学性结肠炎肠上皮损伤与人类UC的表现相似, 其机理是溶于水后的硫酸化多糖作为一种化学毒素可以直接作用于肠上皮细胞并产生破坏 人类肠道具有复杂的免疫系统, 可以减轻消除病原体的感染, 同时保持上皮细胞对食物抗原和非致病菌的耐受性 在接受来自上皮细胞的损伤信号后, 树