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散养鸡马立克氏病的病理学诊断与治疗
马丽氏病是鸡科常见的良性疾病。该病的病因是马丽氏病毒科下属的马丽斯病毒科(mdv)。
2019年10月,河北某地散养的公鸡,自80日龄开始发病,病鸡表现采食量下降、消瘦、零星死亡,主要病理变化特征为腺胃、肝脏、脾脏等内脏器官肿大或有结节出现。根据病理学诊断及PCR检测结果,综合诊断送检病鸡为内脏型MD,该结果为鸡场尽早采取相应措施提供了参考依据。
1 日龄时开始发病
主诉该批散养公鸡共3000只,购入时为6周龄,饲养至80日龄时开始发病,主要表现采食量下降、消瘦、零星死亡。发病后曾先后找基层兽医就诊,按大肠杆菌病和传染性腺胃炎等疾病进行治疗,结果均未见明显疗效,至送检时已淘汰300只左右。
2 临床症状观察
病鸡多表现精神萎靡,不喜活动,鸡冠发育不良,个体瘦弱。
3 病理诊断
3.1 肝脏组织病理学表现
外部检查后,对送检鸡进行内部检查,观察、记录体表及内部器官的肉眼病变。送检病鸡体重偏小、胸肌菲薄。腺胃体积明显变大,腺胃壁增厚、质地变硬、腺胃乳头肿大或黏膜见出血和溃疡(2/5);肝脏体积增大,表面和切面散在小米大至粟粒大小、灰白色结节(3/5);脾脏明显肿大,表面和切面见大小不一灰白色组织浸润(3/5);肾脏肿大,局部呈灰白色(2/5);胸腺萎缩。眼睛、皮肤、坐骨神经及其他内脏无肉眼可见病变。
3.2 病理组织学检测
采集送检鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、腺胃、肾脏等器官,经3.7%甲醛溶液固定24h以上,上述器官按常规制作石蜡切片,H.E染色,用光学显微镜观察组织学变化。镜检可见腺胃、肝脏、脾脏和肾脏中有肿瘤细胞浸润,肿瘤细胞为大、中、小淋巴样细胞、成淋巴细胞及马立克氏病细胞。心脏等器官未见组织学变化。
4 病毒核酸的提取和pcr检测
无菌操作采取送检病鸡肝脏、脾脏等,加入适量灭菌生理盐水经研磨、匀浆、离心取上清液,按常规进行病毒核酸(DNA和RNA)的提取。按照文献方法分别进行MDV和禽白血病病毒的PCR检测。电泳结果显示,送检鸡仅为MDV阳性(图1)。
5 mdv疫苗安全性判定
临床上,MD有神经型、内脏型、眼型和皮肤型4种致病型。MDV多侵害坐骨神经等外周神经,引发神经型MD,病鸡多呈“劈叉”姿势,有时表现为翅膀下垂等。内脏型MD病鸡主要表现为心脏、肝脏、脾脏、肾脏等的肿瘤病灶。眼型MD病鸡主要表现为瞳孔缩小,甚至呈针尖大小,虹膜呈斑点状或者环状,且边缘不整齐,逐渐从正常的桔红色变成弥漫性的灰白色,如同“鱼眼状”。皮肤型MD病鸡可见皮肤毛囊的小结节或者瘤状物。MD肿瘤细胞在组织学上有其特有的形态,即大小不等的淋巴样细胞和变性的成淋巴细胞。因此,通过病理组织学观察,肿瘤细胞符合上述描述特点,即可明确诊断。根据病理学诊断和PCR检测结果,可判定送检散养公鸡属于内脏型MD病例。
据养殖户反映,该批次公鸡出壳时未接种MDV疫苗。因此,建议散养鸡养殖过程中应购买已接种MD疫苗的鸡只。此外,养殖过程中还要注意接种MD疫苗鸡只仍可能出现免疫失败。MD免疫失败的原因包括:MDV早期感染;传染性法氏囊病病毒、鸡传染性贫血病毒等引发的免疫抑制;超强毒力MDV感染;疫苗方面因素,如疫苗运输、保藏和使用不当等。目前,必须采取规范使用疫苗、加强生物安全管理等综合性措施,才能减少该病的发生。
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