SN_T 4811-2017进出口食用动物艾玛菌素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4811—2017进出口食用动物艾玛菌素残留量的测定液相色谱-质谱／质谱法Determination of emamectin benzoate residues in live animal for importand export-LC-MS/MS method2017-07-21 发布2018-03-01 实施中华人民共和国发布KX国家质量监督检验检疫总局N9821刮涂层查真伪 SN/T 4811—2017前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：陈兵、肖陈贵、林彦星、胡运发、沈金灿、刘建利、陈沛金、孙洁、杨俊兴、秦智锋、花群义、卢体康。 SN/T 4811—2017进出口食用动物艾玛菌素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等进出口食用动物中艾玛菌素药物残留量的液相色谱-质谱/质谱检测和确证方法。本标准适用于猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅的血液以及猪、牛、羊尿液中艾玛菌素药物残留量的测定。本标准适用于出人境检验检疫工作。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中艾玛菌素药物残留用乙腈提取，经无水硫酸镁及C18萃取净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。4试剂材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙：色谱纯。4.2甲酸：色谱纯。4.3净化填料：500mg硫酸镁与100mgC18粉末的混合物。4.40.1%甲酸水溶液：取1mL甲酸（4.2)用去离子水定容到1000mL,摇匀。4.50.1%甲酸乙腈溶液：取1mL甲酸（4.2)用乙腈（4.1)定容到1000mL，摇匀。4.6标准曲线定溶液：取50ml.0.1%甲酸水溶液（4.4)和50mL0.1%甲酸乙腈溶液（4.5)混合，摇匀。4.7标准物质：艾玛菌素（Emamectin Benzoate），纯度≥99.4%（艾玛菌素的基本信息见附录 A）。4.8标准储备溶液：100mg/L。准确称取适量的艾玛菌素（4.7），用乙睛配制成浓度为100 mg/L的艾玛菌素标准储备溶液。4.9标准工作溶液：吸取适量的标准储备溶液（4.8），用标准曲线定溶液（4.6)配制成不同浓度系列的标准工作溶液（现用现配）。4.10微孔滤膜:0.22 μm有机膜。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。r SN/T 4811—20175.2高速组织匀浆机。5.3旋涡混匀器。5.4分析天平：感量0.0001g、0.001g和0.1g。5.5移液器:量程 10 μL～100 μL、100 μL～1 000 μL 和 1 000 μL～5 000 μL。5.6聚丙烯离心管：50mL和15mL，具塞。5.7离心机:转速不低于 5 000 r/min。6试样制备与保存血浆：将新鲜血液采集后加入含抗凝剂的试管中，混匀，5000r/min离心10min（温度低于10℃），取上层血浆;尿液：5 000 r/min离心去除沉淀物,取上清液备用。血浆、尿液试样均分为2份，装人入洁净容器，密封，并标明标记，于18℃以下冷冻存放。在制样操作过程中，应防止样品被污染或残留物含量发生变化。7测定步骤7.1提取吸取5 mL试样于 50 mL聚丙烯离心管中，加入 20 mL乙睛（4.1），漩涡混匀 1 min，超声提取20 min,5 000 r/min离心5 min,将提取液转移至另一离心管中，待净化。7.2净化吸取5mL提取液至装有净化填料（4.3)的15mL离心管中，漩涡混匀1 min，5000 r/min离心5 min，取上层溶液过0.22μm有机滤膜，液相色谱-质谱/质谱仪测定。7.3测定7.3.1液相色谱条件液相色谱条件如下：a）色谱柱:C8柱,2.1×100 mm,2.7 um,或相当者;b)流动相及梯度洗脱条件见表1。c)柱温：40℃;d)进样量:10 μL;e)流速:0.3 mL/min。表1流动相及梯度洗脱条件0.1%甲酸乙睛溶液时间0.1%甲酸水溶液%%min050505955.05956.0506.150505010.02 SN/T 4811—20177.3.2质谱条件参见附录B。7.3.3液相色谱~质谱/质谱测定定性测定在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在士2.5%之内；化合物的质谱定