SN_T 2849-2011进出境牛传染性胸膜肺炎检疫规程.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2849—-2011进出境牛传染性胸膜肺炎检疫规程Quarantine protocol of contagious bovine pleuropneumoniafor import and export bovine2011-02-25 发布2011-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局303T SN/T 2849—2011前言本标准按照GB/T 1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫局。本标准主要起草人：简中友、李叶、马贵平、史喜菊、贾、胡传伟、苏永生、孙颖杰。 SN/T 2849—2011进出境牛传染性胸膜肺炎检疫规程1 范围本标准规定了牛传染性胸膜肺炎（contagious bovine pleuropneumonia,CBPP)诊断技术要求。本标准适用于进出境牛传染性胸膜肺炎检疫、诊断及流行病学调查。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件2. 1牛传染性胸膜肺炎 contagious bovine pleuropneumonia; CBPp牛传染性胸膜肺炎(CBPP)也称牛肺疫,是由丝状支原体引起牛的一种接触性传染病，主要侵害牛的肺和胸膜,其病理特征为纤维素性或浆液纤维素性肺炎、胸膜炎3缩略语下列缩略语适用于本文件。CBPP(contagious bovine pleuropneumpnia)：牛传染性胸膜肺炎C-ELISA(competitive enzyme-linked immunosor争酶联免疫吸附测定法rbent assay)CFT(complement fixation t5：补体结合试验14流行病学、临床及病理诊断4.1 流行病学在自然条件下,本病主要感染牛等反台动物,如黄牛、耗牛、水牛、编牛、奶牛,其中3岁～7岁的牛多发,犊牛少见。4. 2临床症状急性型：呈急性胸膜肺炎症状，体温升高,热型为稽留热。呼吸困难，气喘，呈腹式呼吸，频发咳嗽，流浆液性或脓性鼻液。胸部叩诊呈浊音或水平浊音，听诊肺泡音弱或消失，出现罗音、支气管呼吸音和胸膜摩擦音。后期可见胸前皮下和肉垂水肿。病牛迅速消瘦，常窒息死亡。慢性型：病牛消瘦，偶发干性咳嗽，胸部听诊和叩诊无明显变化。4.3 病理特点本病的特征病变主要在肺和胸腔。发病初期，多见炎性浸润，以小叶性支气管炎为特征，小叶呈灰红色局灶性充血或炎性水肿。随病程发展,多数呈典型的浆液性纤维素性胸膜肺炎、胸膜炎，一侧的叶和中间叶高度肿大，质度坚实如肝脏，肺肝变，常见互相镶嵌的暗红色、灰红色乃至灰黄色的肝变同时存在，外观呈大理石花纹。病程较长者，病变部的肺组织发生肉变和坏死,坏死灶被结缔组织包围，进一步形成空洞或瘢痕。1 SN/T 2849-—2011有些病例的胸腔积液呈淡黄色透明或纤维素絮状物(或絮片），严重病例发生肺与胸膜黏连。纵隔淋巴结和支气管淋巴结显著肿大，切面多汁，呈黄白色，并有坏死灶。5 病原分离与鉴定本试验应在生物安全Ⅲ级及以上实验室进行。5.1材料准备5.1.1器材：组织匀浆器、培养血、小试管、玻片、染色缸、接种环、二氧化碳培养箱、普通显微镜。5.1.2培养基和试剂：10%马血清马丁肉汤、普通10%马血清马丁琼脂、葡萄糖生化培养基、精氨酸生化培养基、四氮唑盐生化培养基、5%铬酸水溶液、姬姆萨氏染液，配制方法见A.1A.7。5.2样品采集和送检无菌采取病牛鼻腔分泌物或胸腔积液、血液和关节滑液，或剖检时采取肺脏病变组织、肺门淋巴结和胸腔渗出液，置于含运输培养基的灭菌容器中，以冷藏状态立即送实验室检疫。不能立即送检的，应置一20℃低温保存。5.3样品处理胸腔液、血液和关节滑液可直接用作接种材料。组织样品匀浆后，用含500IU/mL青霉素及1：7000乙酸铊的肉汤10倍稀释，置于4℃过夜，即为接种样品液。5.4样品接种5.4.1用灭菌吸管吸取0.1mL～0.3mL样品液,无菌接种于5管10%马血清肉汤培养基中,37℃培养10 d。5.4.2用无菌接种环钓取样品液在10%马血清肉汤琼脂平板上划线接种，每个样品接种5个平板。平板用胶布封口，倒置于5%二氧化碳培养箱中37℃培养10d。5.5观察5.5.1从接种后第3d开始直至第10 d,每天观察接种管及平板生长情况。5.5.2在10%马血清肉汤试管中，牛传染性胸膜肺炎病原的生长表现为：初期呈轻微浑浊或白色点状或丝状，后逐渐均匀浑浊，呈半透明稍带乳光，无菌膜或沉淀，也无颗粒悬浮。5.5.3在10%马血清肉汤琼脂培养基上，牛传染性胸膜肺炎病原的生长表现为：生长缓慢，为水滴状圆形略带灰色的微小菌落，中央有乳头状突起，呈“煎蛋”样外观，菌落直径约为0.2m