SCT 7203.2-2007对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 第2部分：组织病理学诊断法.pdf

ICS 65.020.30B 41Sc中华人民共和国水产行业标准SC/T 7203.2—2007对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程第2部分：组织病理学诊断法Diagnostic Protocols for Hepatopancreatic Parvovirus Diseaseof Penaeid Shrimp-Part 2: Histopathological Method2007~09-01实施2007-06-14 发布中华人民共和国农业部发布 SC/T 7203.2—2007前言SC/T 7203《对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程》分为三个部分：-第1部分:PCR检测法;第 2 部分:组织病理学诊断法;-第3部分：新鲜组织的T-E染色法。本部分为SC/T7203的第2部分。本部分由中华人民共和国农业部渔业局提出。本部分由全国水产标准化技术委员会归口。本部分起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站。本部分主要起草人：黄健、杨冰、陈爱平、宋晓玲、史成银、杨丛海、魏琦。I SC/T 7203.2--2007对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程第2部分：组织病理学诊断法1范围SC/T 7203 的本部分规定了对虾肝胰腺细小病毒病组织病理学诊断法的原理、试剂与材料、仪器设备、操作步骤和结果判定。本部分适用于对虾感染肝胰腺细小病毒（Hepatopancreatic Parvovirus,HPV)情况的确诊或未知疾病样品的组织病理学评价。不适于对病毒的非感染性携带的标本进行病毒检测。2　规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。SC/T 7202.3一2007斑节对虾杆状病毒病诊断规程第 3 部分:组织病理学诊断法3原理3.1 对虾肝胰腺细小病毒病的病原和病理学特征对虾肝胰腺细小病毒病的病原为肝胰腺细小病毒(Hepatopancreatic Parvovirus,HPV),病毒粒子为正二十面体,大小为 22 nm～24 nm,含单链 DNA。主要感染对虾的肝胰腺盲管近末端的 F 型和 E 型上皮细胞，细胞感染的早期在细胞核中央靠近核仁处形成小的嗜酸性包涵体,随著感染进程包含体明显增大，呈嗜碱性的致密卵球形态。HPV主要在对虾幼体、仔虾和早期幼虾中形成较严重的感染，成虾期的感染依然存在，但通常细胞受感染比率极低。HPV的宿主范围较为广泛，包括中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）、墨吉明对虾（F.merguiensis）、短沟对虾(Penaeus semisulcatus）、食用对虾（P.esculentus）、斑节对虾（P.monodon）、日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）、长毛明对虾（F.penicilatus）、凡纳滨对虾（Litopenaeus van-namei)和细角滨对虾（L.stylirostris）等。3.2技术原理见 SC/T 7202.3一2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分:组织病理学诊断法)中 3.2的规定。4试剂和材料4.1 除阳性对照、阴性对照外,见 SC/T 7202.3一2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程 第 3 部分:组织病理学诊断法)中 4 的规定。4.2阳性对照为受 HPV 感染的对虾制成的组织切片。4.3阴性对照为未受 HPV感染的对虾制成的组织切片。5仪器设备见 SC/T 7202.3-2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程第 3部分:组织病理学诊断法)中第 5章1 SC/T 7203.2--2007的规定。6操作步骤按照 SC/T 7202.3一2007(斑节对虾杆状病毒病诊断规程第 3 部分:组织病理学诊断法)中第 6章的规定执行。在组织修整时,要保证对虾的肝胰腺能被切片和染色。7 结果判定7.1HPV 感染的判定依据受 HPV感染的肝胰腺盲管近末端上皮细胞核内的单个球形或卵球形包涵体的存在。7.2细胞受感染的早期,核内包涵体较小,位于细胞核的中央，紧临核仁,嗜伊红着色。随着细胞感染加深,细胞核随着包涵体的明显增大而增生，包涵体呈致密嗜碱性着色。核仁增生，与发育着的包涵体紧邻,并被推向细胞核的一侧。染色质位于细胞核边缘,在染色质和包涵体之间形成明显的亮圈。7.3感染程度与受感染肝胰腺细胞的数量相关,幼体、仔虾或早期幼虾的肝胰腺细胞感染率常见在10%以上,成虾的肝胰腺细胞的感染率通常在1%以下。7.4诊断结果可疑时,补充 PCR检测法进行结果确认。2 L/OS中华人民共和国水产行业标准对虾肝胰腺细小病毒病诊断