食用菌病害检疫鉴定方法.pdfVIP

ICS 65.020.01 CCS B 16 中华人民共和国国家标准 GB/T XXXXX—20XX 食用菌病害检测鉴定方法 Detection and Identification of Diseases from Edible Fungi （征求意见稿） 20XX-XX-XX 发布 20XX-XX-XX 实施 国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发布 1 GB/T××××—20×× 食用菌病害检测鉴定方法 1 范围 本文件明确了食用菌病害的检测鉴定方法。 本文件适用于国内生产和进口的各类食用菌中真菌病害、细菌病害和病毒病害的检测鉴 定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅注日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括 所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 12728 食用菌术语 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB/T 27402 实验室质量控制规范 植物检疫 GB/T 27403 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测 3 术语、定义和缩略语 3.1 术语和定义 GB/T 12728界定的术语和定义适用于本文件。 3.2 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 Ct ：循环阈值（Cyclethreshold ） CTAB ：十六烷基三甲基溴化铵（Cetyltrimethylammonium Bromide ） DNA ：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic Acid ） NCBI ：美国生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information ） OD ：光密度（Optical Density ） PCR ：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction ） PDA ：马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar ） RNA ：核糖核酸（Ribonucleic Acid ） RT-PCR ：反转录聚合酶链式反应 （Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction ） 4 总体要求 根据病害种类的不同，一般根据形态学特征、分子生物学特征、致病性特征、生理生化 特征等进行种类鉴定，需采用多种检测方法综合进行结果判定。 3 GB/T××××—20×× 在整个试验操作过程中应采用安全有效的防护措施，具体要求应符合GB 19489、GB/T 27402、GB/T 27403 中的规定。 5 仪器及用具 5.1 仪器设备 光照培养箱、高压灭菌器、超净工作台、生物显微镜、高速冷冻离心机、纯水仪、恒温 水浴锅、低温冰箱、电子天平、酶标仪、PCR仪、荧光定量PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成 像分析仪等。 5.2 用具 培养皿、烧杯、酒精灯、微型解剖刀、解剖针、吸管、标签、指形管、镊子、放大镜、 载玻片、盖玻片、记号笔、可调式微量进样器（2 μL、10 μL、20 μL、100 μL、200 μL、1000 μL ）及相应的进样枪头、研钵、离心管（1.5 mL、10 mL）、PCR管（0.2 mL ）、量筒、烧 杯等。