第八章细菌和噬菌体的重组和连锁.pptVIP

第 二 节 细菌的遗传分析* 一、细菌的杂交 二、F因子与接合 三、高频重组与中断杂交技术 四、F因子整合到细菌染色体的过程 五、细菌基因的交换过程 六、重组作图 七、性导 当前第26页\共有65页\编于星期三\10点 一、细菌的杂交 （一）、质粒的种类 （二）、质粒的性质 （三）、细菌杂交的发现 第二节 细菌的遗传分析 当前第27页\共有65页\编于星期三\10点 质粒：细菌中除主染色体之外，能独立自我复制和决定某些性状的遗传单位。可随细胞分裂分配到子细胞中。 （一）质粒的种类 1、根据质粒在细菌间能否传递分二类： （1）感染性质粒：能从一个细菌体内转移到另一个细菌体内。 （2）非感染性质粒：不能从一个细菌体内转移到另一个细菌体内。 2、根据质粒存在的状态分： （1）自主复制型质粒：独立于宿主染色体之外。F因子 （2）结合态质粒：能插入（整合）到主染色体上，并成为主染色体的一部分。当环境改变时，结合态质粒还能脱离主染色体成为自主复制型质粒。F因子。 3、根据质粒的功能分： （1）致育质粒：决定细菌的交配状态。F因子 （2）抗性质粒：决定细菌的抗药性，抗某些金属等属性。大肠杆菌中的R因子。 （3）分解性质粒等。 当前第28页\共有65页\编于星期三\10点 1、复制作用：质粒为分子量较小的环状双链DNA分子，能够自我复制。 2、与染色体的结合作用：质粒可以独立存在于细胞质中，也可以整合到主染色体上，成为染色体的一部分，这样的质粒特称为附加体。 3、质粒的不亲和性：通常含有相同基因的质粒（具有相当程度同源性的两个 质粒）不能稳定地存在于一个细菌中，它们属于同一亲和群。属于不同亲 和群的质粒可以稳定地共存于同一细菌中，它们的DNA缺少同源性。 4、消失作用：质粒在寄主细胞内，有时会自行消失。吖黄素处理可使F+变成F-。 5、质粒移动性：可以在同种个体间移动（F因子），也可以在种间转移（R因子）。 6、每个质粒的结构中都含有与自主复制有关的区域。可转移的质粒具有与转移有关的基因。 （二）质粒的性质 当前第29页\共有65页\编于星期三\10点 细菌菌株的命名 按照它们所短缺的、不能合成的物质来命名，取前面三个字母，右上角写上负号“-”，或正号“+”，负号代表缺陷型或突变型，正号代表野生型。 如 菌株A met- bio- thr+ leu+ thi+ 菌株B met+ bio+ thr- leu- thi- 对抗生素敏感或抗性的品系，也取前面三个字母，不过在右上角写上s或r,代表敏感或抗性。 如 对链霉素敏感的写成strs,对链霉素抗性的写成strr。 当前第30页\共有65页\编于星期三\10点 1、Lederberg和Tatum（1946），大肠杆菌杂交实验 选用大肠杆菌K-12的两种不同营养缺陷型： A菌株： met - bio- thr+ leu+ thi+ ，甲硫氨酸、生物素缺陷型 B菌株： met+ bio+ thr - leu- thi- ，苏氨酸、亮氨酸、维生素B1缺陷型 方法：混合培养A和B菌株 在基本培养基上涂布培养 结果：平板上长出原养型（ met+bio+thr+leu+thi+）菌落。 塔特姆 （1909～1975） 莱德伯格（1925～） 1958年 诺贝尔奖 （三）细菌杂交的发现 当前第31页\共有65页\编于星期三\10点 细菌的接合试验 当前第32页\共有65页\编于星期三\10点 2、对上述实验结果的几种可能解释及其分析： 上述试验结果原养型菌落可能产生于： 亲本细菌A或B发生了回复突变； 亲本细菌A和B泄露了产物，混合后这些产物通过培养基交换，互相补充了对方的不足而得以在基本培养基上生长 ——互养作用； 为了验证这些原养型菌落产生的可能而进行的研究最终表明：这些解释均不成立。 当前第33页\共有65页\编于星期三\10点 回复突变可能性的排除： Lederberg和Tatum利用的双营养缺陷型菌株进行试验，已基本排除A或B品系发生回复突变产生原养型细菌的可能。 1、单基因回复突变的频率约为10-6； 2、2个基因同时回复突变的频率则为10-12，3个基因同时回复突变为10-18，频率很低。 3、但试验中产生原养型菌落产生的频率非常高，因此基本可以排除回复突变的可能。 当前第34页\共有65页\编于星期三\10点 互养作用及其排除： 戴维斯(Dawis, 1950)的U型管试验(结果没有得到原养型细菌，排除了互养作用。)；菌株A met – bi