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kx-21n血细胞分析仪线性范围评价方法的探讨 线性区域或分析测量范围是检测系统的主要性能之一。“实验室管理方法”要求实验室在评估和验证检测系统的分析测量范围时进行评估和验证。在文献中，有许多关于线性区域评估方法的报告。虽然操作过程简单，但统计分析复杂，需要特定的统计基础。为此我们采用了北京中创易达公司开发的MVS软件, 依据CLSI的EP6-A文件要求对KX-21N主要检测项目 (RBC、Hb、HCT、WBC、PLT) 进行了线性范围的评价, 现报道如下。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 仪器和试剂 1.1.2 标准物质 1.1.3 样品 为日常工作中随机选择的病人新鲜全血, 有高值和中值样品, 参考EP6-A文件对高、中值样品进行等比稀释。 1.2 方法 1.2.1 机器校准 先对KX-21N进行一次日常保养, 再用SCS-1000校准品对KX-21N进行一次校准, 使KX-21N处于最佳状态。 1.2.2 样品等比及测定 (1) RBC、Hb、HCT、WBC (中低值) 、PLT (中低值) 线性范围的评价:选取4个血型相同, RBC、Hb、HCT、WBC及PLT检测结果正常的4份病人新鲜全血样品, 混匀后离心吸出3.0ml血浆, 设3.0ml血浆为低值 (L) 样品, 剩余部分样品为高值 (H) 样品, 再按EP6-A文件中附件A的要求进行等比稀释成9个样品, 每个样品重复测定两次, 分别记录RBC、Hb、HCT、WBC (中低值) 、PLT (中低值) 结果。 (2) WBC、PLT高值段线性范围的评价:选取一个WBC、PLT计数值均很高的慢粒病人, 取静脉血样4ml用EDTA-K2抗凝, 离心分离出血浆和血细胞, 吸取血浆为低值 (L) 样品, 剩余部分为高值样品 (H) , 参考EP6-A文件附件A的要求进行等比稀释成9个样品, 每个样品重复测定两次, 分别记录WBC、PLT (高值) 的检测结果。 1.2.3 统计处理 采用MVS软件对RBC、Hb、HCT、WBC、PLT检测的结果按EP6-A文件要求进行多项式回归分析。 2 结果 3 本研究项目的线性范围 sysmex公司生产的KX-21N血细胞分析仪及配套的释稀液和溶血素。 为配套校准品SCS-1000, 批号为:093824 2.1 4个检测值正常病人新鲜全血样品处理后作等比稀释的9个样品RBC、Hb、HCT、WBC (中低值) 、PLT (中低值) 检测结果见表1。 2.2慢粒病人新鲜全血样品处理后作等比稀释得9个样品WBC (高值) 、PLT (高值) 两个项目检测结果见表2。 2.3用MVS软件对上述RBC、Hb、HCT、WBC (中低值) 和WBC (高值) 、PLT (中低值) 和PLT (高值) 检测数据进行多项回归分析, 结果见表3。 2.4对表3中统计分析为非线性的项目剔除一端或两端的数据后再次运用MVS软件进行多项式回归分析, 其结果见表4。 3.1本研究是按照EP6-A文件的方法进行样品处理分析, 采用了北京中创易达公司的MVS软件进行统计分析, 结果表明KX-21N检测RBC、Hb、HCT, RBC在0.01~6.14×1012/L、Hb在24~175g/L、HCT在0.071~0.54L/L范围内呈线性关系, 而在对WBC、PLT线性范围评价时由于很难找到合适的样品而采用了两个浓度段 (高值和中低值) 的两个样品进行研究, 结果表明KX-21N在检测WBC时在0.1~5.2×109/L, 10.1~86.3×109/L范围内呈线性, 这里提示WBC在5.2~10.1×109/L之间是否呈线性有待研究。血小板在6~863×109/L呈线性而中值样品的研究结果是在51.5~167.5×109/L范围内呈线性, 与高值样品研究结果相矛盾, 这是否是由于实验误差引起有待进一步分析。 3.2本研究中各项目线性范围的高值是否是KX-21N测定各项目线性范围的最高点回答是否定的, 这只是由于本研究仅能取到此高值处的样品而已。 3.3线性范围是检测系统最重要的性能指标之一, 样品的检测结果在线性范围之内时检测结果可靠, 如超过线性范围, 就要对样品进行稀释或浓缩, 否则检测的结果与真值的误差就超过了临床可接收的允许范围。因此对检测系统线性范围的评价是非常必要的。熟悉所用检测系统的线性范围的评价方法是对检验人员的基本要求。 3.4很多文献有线性范围评价方法的报道, 有目测法、斜率法和EP6-A文件的评价方法, 前者很粗糙且不精确, 后两者方法复杂, 且要有一定的统计学知识, 这对绝大多数检验人员很难实现, 中创易达公司开发的MVS软件, 使得复杂的统计变得简单快捷, 方便实用, 值得推广应用。