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洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞骨架察看实验报告 吴若自然科学大类单周四1192016/11/17 一、实验目的: 掌握用光学显微镜察看植物细胞骨架的原理及方法。 认识细胞骨架的形态，联系细胞骨架的功能。 二、实验原理： 细胞骨架是指真核细胞中的蛋白纤维网架系统。广义的细胞骨架包含细胞核骨架、细胞质骨架、细胞膜骨架和细胞外基质。依据蛋白质纤维的直径、构成成分和组装构造的不一样可分 为微丝、微管和中间纤维。细胞骨架关于保持细胞的形态构造及细胞运动、物质运输、能量变换、 信号传导和细胞分裂等有重要的作用。本试验采纳去垢剂TritonX-100的缓冲液办理植物资料时， 可将细胞的膜构造和大多数蛋白质抽提掉，但细胞骨架系统的蛋白却被保留下来，后者用考马斯 亮蓝R250染色，在光学显微镜下可见一种网状构造。 三、操作步骤： 1.取洋葱内皮表层膜1cm2(可多取两片)左右置于含2mlPBS液的小皿中润湿5min后，吸 去PBS 向小皿中加入1.5mlTritonX-100(1%)，淹没20min后，吸走TritonX-100 向小皿中加入2mlMbuffer淹没置于摇床上5min，重复两次后，吸走Mbuffer 向小皿中加入105ml戊二醛（3%），淹没30min后，吸走戊二醛 向小皿中加入2mlPBS，淹没置于摇床上5min，重复两次 拿出表皮平铺于载玻片上，滴加100微升，静置100min后汲取