高效液相色谱法—高效液相色谱法（食品仪器分析课件）.pptx

高效液相色谱法;一、高效液相色谱法简介 高效液相色谱法（HPLC）起源于经典液相色谱法，它是现代分析化学中最重要的分离分析方法之一。直到20世纪60年代后期，才产生了具有现代意义的高效液相色谱。 高效液相色谱是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术。国际市场调查表明，高效液相色谱仪在分析仪器销售市场中占有最大的份额，增长速度最快。;二、高效液相色谱法的特点 高效液相色谱的优点是：检测的分辨率和灵敏度高，分析速度快，重复性好，定量精度高，应用范围广。适用于分析高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物，以及生物活性物质和多种天然产物。 其缺点是：价格昂贵，要用各种填料柱，容量小，分析生物大分子和无机离子困难，流动相消耗大且有毒性的居多。;高速：HPLC采用高压输液设备，流速大增加，分析速度极快，只需数分钟；而经典方法靠重力加料，完成一次分析需时数小时。 高效：填充物颗粒极细且规则，固定相涂渍均匀、传质阻力小，因而柱效很高。 高灵敏度：检测器灵敏度极高：UV—10-9g, 荧光检测器—10-11g。;分析对象及范围：GC分析只限于气体和低沸点的稳定化合物；HPLC可以分析高沸点、高分子量的稳定或不稳定化合物，这类物质占有机物总数的80%。 流动相的选择：GC采用的流动相中为有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小；HPLC采用的流动相为液体或各种液体的混合，可供选择的机会多。流动相对分离的贡献很大，可通过溶剂来控制和改进分离。 操作温度：GC需高温；HPLC通常在室温下进行。