高效液相色谱法—高效液相色谱实验技术（食品仪器分析课件）.pptx

定性定量分析;一、定性分析 （1）与气相色谱法的定性分析类似 保留值和相对保留值对照定性及加入已知物增加峰高定性 （2）联用技术 LC-DAD、LC-MS、LC-FTIR ;二、定量分析 外标法、内标法、归一化法及标准加入法。 ;高效液相色谱实验技术;一、HPLC的日常操作条件 温度10～30℃;相对湿度≤80％； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。;二、泵的保养  1）使用流动相尽量要清洁；  2）进液处的沙芯过滤头要经常清洗；  3）流动相交换时要防止沉淀；  4）避免泵内堵塞或有气泡。 三、进样器的保养 ???? 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。;四、柱的保养 （1）柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动； （2）当柱子和色谱仪联结时， 阀件或管路一定要清洗干净； （3）要注意流动相的脱气； （4）避免使用高粘度溶剂作为流动相；??;（5）进样样品要提纯； （6）严格控制进样量； （7）每天分析结束后，要清洗进样阀中残留的样品； （8）每天分析结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱； （9）若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭；;五、检测器(UV)的保养 （1）紫外灯的保养：在分析前、柱平衡的差不多时，打开检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。 （2）样品池要保养。;六、提高柱效的方法 （1）固定相填料要均一，颗粒细，装填均匀。 （2）流动相粘度低。 （3）低流速。 （4）升高柱温。;七、色谱柱的再生 （1）将变色部分除去，再补充新的固定相。 （2）吸附未被洗脱成分时，选择合适溶剂进行洗净。 （3）离子交换树脂柱需要多次清洗。 （4）用泵把大体积起始溶剂压经柱子。;八、实验前准备工作 （1）流动相溶液的处理，包括水、有机溶剂、溶剂的过滤和脱气。 （2）试样溶液的制备，需经微孔滤膜过滤。 ;九、样品处理技术 （1）溶剂萃取。 （2）吸附。 （3）除蛋白质。 （4）超过滤。