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利用RNAi阻抑BI-1基因表达调控肺癌耐药相关基因的实验研究的中期报告
本实验的目的是通过RNAi技术阻抑BI-1基因的表达,以探究其对肺癌耐药相关基因的调控作用。经过一段时间的实验,我们已经完成了实验的中期里程碑,现将进展情况进行汇报。
实验方法:
我们在肺癌耐药细胞株A549/DDP中,利用RNAi技术构建了干扰BI-1基因表达的质粒,分别将空白质粒和RNAi质粒转染到A549/DDP细胞中,通过Western blot和RT-qPCR检测BI-1基因的表达水平和肺癌耐药相关基因的表达水平,并进行统计分析。
实验进展:
经过一段时间的实验,我们已经完成了RNAi质粒的构建和转染实验,初步结果如下:
1. Western blot分析:
通过Western blot检测BI-1的表达情况,结果显示RNAi质粒转染组中,BI-1的表达水平显著下降,与空白质粒转染组相比,差异显著(P 0.05)。这表明RNAi技术可以成功地抑制BI-1的表达,为后续实验打下了基础。
2. RT-qPCR分析:
通过RT-qPCR检测肺癌耐药相关基因ABCB1、ABCG2和MDR1的表达水平,结果显示,在RNAi质粒转染组中,ABCB1、ABCG2和MDR1的表达水平显著下降,与空白质粒转染组相比,差异显著(P 0.05)。这表明,BI-1基因的表达与肺癌耐药相关基因ABCB1、ABCG2和MDR1的表达有密切关系。
下一步工作:
我们将针对实验中得到的初步结果,进一步探究BI-1基因与肺癌耐药相关基因之间的调控机制。我们计划通过建立BI-1基因的转染模型,以及CRISPR-Cas9敲除技术,进一步证实BI-1基因调控肺癌耐药相关基因的作用,并深入研究其作用机制。同时,我们也将进一步拓展实验规模,验证实验结果的可靠性和数据的稳定性。
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