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核苷酸代谢 Metabolism of Nucleotides 主要内容第一节 概 述第二节 核苷酸的分解代谢第三节 核苷酸的合成代谢 第一节 概 述 作为核酸合成的原料，是核酸的基本组成单位 体内能量的利用形式，ATP是重要能量货币 参与代谢和生理调节，cAMP是第二信使 组成辅酶，如NAD、 FAD、 COA等 活化中间代谢物，其衍生物是许多生化反应的中间供体 ，如UDPG 、SAM等 一、核苷酸的生物功能 二、核酸和核苷酸的降解食物核蛋白蛋白质核酸（RNA及DNA）胃酸核苷酸胰核酸酶核苷磷酸胰、肠核苷酸酶碱基戊糖核苷酶 1、核酸酶的定义及分类 指所有可以水解核酸的酶。依据底物不同分类DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)：专一降解DNA的酶。RNA酶 (ribonuclease, RNase)：专一降解RNA的酶。依据切割部位不同核酸内切酶：限制性核酸内切酶 非限制性核酸内切酶核酸外切酶：5′→3′或3′→5′核酸外切酶三、核 酸 酶（Nuclease） 外切核酸酶对核酸的水解位点5′ p p p pOHB p p p p3′BBBBBBB牛脾磷酸二酯酶（ 5′端外切5得3）蛇毒磷酸二酯酶（ 3′端外切3得5） 内切核酸酶对RNA的水解位点示意图5′ p p p pOHPyPuPyPy1′ p p pGACU p p pGA3′RNAase IRNAase IRNAase T1RNAase T1Pu ：嘌呤 Py：嘧啶 2. 限制性内切酶? 类型? 命名? 意义 原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶（ristriction endonuclease）。 常用的DNA限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明‥ ‥A G C T ‥‥‥ ‥T C G A ‥ ‥‥ ‥G G A T C C ‥‥‥ ‥C C T A G G ‥‥‥ ‥A G A T C T ‥‥‥ ‥T C T A G A ‥‥‥ ‥G A A T T C ‥‥‥ ‥C T T A A G ‥‥‥ ‥A A G C T T‥‥‥ ‥T T C G A A ‥‥‥ ‥G T C G A C ‥‥‥ ‥C A G C T G ‥‥‥ ‥C C C G G G ‥‥‥ ‥G G G C C C ‥‥Bam H IAlu IBgl IEco R IHind ⅢSal ISma I四核苷酸，平端切口六核苷酸，平端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口 （1）限制性内切酶类型 I型：分子量大于105，多亚基，需S-线苷蛋氨酸、ATP和Mg2+ ，识别位点与切割位点相差甚远，产物为异质，是限制与修饰相排斥的多功能酶。 II型：分子量小于105，需Mg2+ ，切割位点位于识别 位点上，产物为专一性片段，不具修饰酶功能。现在分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。 III型：识别位点为5-7bp的非对称序列 ，切割位点在顺序之外离识别 序列5-10bp，切割双链，个别也切割单链。是限制与修饰相多功能酶。 （2）限制性内切酶的命名和意义Eco R I序号属名种名株名例：Eco R I，这是从大肠杆菌（Ecoli）R菌珠中分离出的一种限制性内切酶 限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、进行DNA序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，是一把天赐的神刀，用来解剖纤细的DNA分子。 参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 体外重组DNA技术中的重要工具酶 生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解3、核酸酶的功能 四、核苷酸的体内存在形式及分布（一）细胞内以5’－NTP形式存在（二）NTP浓度高于dNTP（三）不同组织细胞中各种核苷酸分布差异较大五、体内核苷酸的来源自身合成（主要途径）食物（次要） 第二节 核苷酸的分解代谢实际上就是碱基的分解代谢 一、嘌呤碱的分解代谢 嘌呤碱的最终代谢产物AMPGMPH（次黄嘌呤）GX（黄嘌呤）黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶 不同生物体内存在的酶不同，嘌呤分解的终产物不同 人类和排尿酸动物（鸟类、昆虫）—尿酸为终产物其它哺乳动物—尿囊素鱼类、两栖类—尿囊无脊椎动物