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染色体原位杂交技术在植物体系育种中的应用 1 植物染色体原位杂交 原始杂交技术（ih）是成功结合药理学和组织化学的产物。1969年Gall、Pardue和John等首次建立该技术,并应用于组织切片和细胞标本上。此后,原位杂交技术广泛应用于动植物物理作图、杂种中供体基因组的识别、染色体易位互换的鉴别、内外源基因在转录、翻译水平上的特异性研究、基因组空间分布研究以及系统进化和亲缘关系研究等。 原位杂交技术可以分为染色体原位杂交和RNA原位杂交。染色体原位杂交技术(chromosome in situ hybridization,CISH)是根据核酸分子碱基互补配对原则,首先获得染色体DNA制片,然后将染色体制片DNA和经过放射性或非放射性标记的外源核酸即探针变性为单链,二者复性,成为杂合双链核酸,再通过一定检测手段将外源核酸在染色体上的位置快速、直观、准确地显示出来。RNA原位杂交则是用标记的外源核酸对组织细胞中的RNA进行原位定位。 20世纪80年代末,出现了利用荧光素进行标记或检测的荧光原位杂交(fluorescence insitu hybridization,FISH)技术,使信号检出率成倍提高。随着组织化学和分子生物学的进一步发展,CISH技术不断改进和完善,在方法上放射性同位素标记已逐渐被分辨率高、安全、节时的非放射性标记,如生物素、荧光素、地高辛等所取代,形成了从化学显