化妆品中丙烯酰胺、地氯雷他定等51种原料、巯基乙酸等8种原料、游离甲醛、α-熊果苷等4种原料的检验方法.docxVIP

化妆品中丙烯酰胺的检验方法 　　　　　17.化妆品中地氯雷他定等51种原料的检验方法 　　　　　18.化妆品中巯基乙酸等8种原料的检验方法 　　　　　19.化妆品中游离甲醛的检验方法 　　　　　20.化妆品中α-熊果苷等4种原料的检验方法 附件16 化妆品中丙烯酰胺的检验方法 Determination of Acrylamide in Cosmetics 1 范围 本方法规定了液相色谱-串联质谱法测定化妆品中丙烯酰胺的含量。 本方法适用于液态水基类、液态油基类、凝胶类、膏霜乳液类、粉类化妆品中丙烯酰胺含量的测定。 2 方法提要 样品提取、净化后，采用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性、定量离子对内标法定量，以标准曲线法计算含量。 本方法取样量为1.0 g时，检出浓度为0.01 mg/kg，最低定量浓度为0.03 mg/kg。 3 试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 标准品：丙烯酰胺、氘代丙烯酰胺（2,3,3-D3）标准品信息详见附录A。 3.2 甲醇，色谱纯。 3.3 石油醚（30~60 ℃）。 3.4 甲酸，色谱纯。 3.5 5%甲酸溶液：吸取甲酸（3.4）5 mL，加水至100 mL，摇匀，即得。 3.6 0.05%甲酸溶液：吸取甲酸（3.4）0.5 mL，加水至1000 mL，摇匀，即得。 3.7 标准储备溶液（1.0 mg/mL）：称取丙烯酰胺标准品（3.1）10 mg（精确至0. 00001 g），置10 mL容量瓶中，加水使溶解并定容至刻度，摇匀，即得。 3.8 标准工作溶液（10.0 μg/mL）：精密量取标准储备溶液（3.7）1 mL，置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 3.9 标准工作溶液（1.0 μg/mL）：精密量取标准储备溶液（3.8）10 mL，置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 3.10 标准工作溶液（1.0 μg/mL）：称取氘代丙烯酰胺（2,3,3-D3）标准品（3.1）10 mg（精确至0.00001 g），置100 mL容量瓶中，加水使溶解并定容至刻度，摇匀，即得。 3.11 内标工作溶液（1.0 μg/mL）： 精密量取内标标准储备溶液（3.10）1 mL，置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 3.12 微孔滤膜（0.22 μm）。 4 仪器和设备 4.1 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 4.2 天平。 4.3 超声波清洗器。 4.4 离心机，转速不低于12000 r/min。 4.5 涡旋混合仪。 5 分析步骤 5.1 标准系列溶液的制备 分别精密吸取1.0 μg/mL的标准工作溶液（3.9）20、50、200 μL，10.0 μg/mL的标准工作溶液（3.8）50、100、200 μL，置不同的10 mL容量瓶中，分别精密加入1.0 μg/mL的内标工作溶液（3.11）200 μL，用水稀释至刻度，摇匀，配制得丙烯酰胺的质量分数分别为0.02、0.05、0.2、0.5、1、2 mg/kg的标准系列溶液。 注：上述标准系列溶液中丙烯酰胺的质量分别为0.02、0.05、0.2、0.5、1、2 μg，内标的质量均为0.2 μg，折算到样品中（称样量以1.0 g计），相当于丙烯酰胺的质量分数分别为0.02、0.05、0.2、0.5、1、2 mg/kg。 5.2 样品处理 称取样品1.0 g（精确至0.001 g），精密加入1.0 μg/mL的内标工作溶液（3.11）200 μL，涡旋30 s，加水10 mL、石油醚（3.3）10 mL，涡旋1 min，超声处理10 min，于12000 r/min离心10 min，取下层水溶液3 mL，加5%甲酸溶液（3.5）60 μL、石油醚（30～60 ℃）（3.3）3 mL，涡旋30 s，于12000 r/min离心10 min，取下层水溶液，经微孔滤膜（3.12）过滤，取续滤液作为待测溶液。 5.3 参考液相色谱-三重四极杆质谱联用条件 5.3.1 色谱条件 色谱柱：C18柱（4.6 mm×150 mm，3.0 μm），或等效色谱柱； 流动相：A：0.05%甲酸溶液（3.6），B：甲醇（3.2）；梯度洗脱程序见表1； 表1 流动相梯度洗脱程序 时间/min V（A）/% V（B）/% 0.0 90 10 8.0 90 10 8.5 0 100 12.0 0 100 13.0 90 10 19.0 90 10 流速：0.3 mL/min； 柱温：25 ℃； 进样量：10 μL。 5.3.2 质谱条件 离子源： 电喷雾离子源（E