PEG诱导细胞融合.pptVIP

PEG诱导细胞融合;细胞融合;细胞融合技术;细胞融合开展史;2.PEG作为促融剂引起的革命、 由于病毒诱导细胞融合存在着病毒制备困难、操作复杂、灭活病毒的效价差异大等原因,科学家们又尝试寻找比病毒简便、快速和高效且比病毒更易制备和控制、活性稳定、使用方便的化学PEG加拿大华裔科学家高国楠等〔 1974 年〕 的研究取得重大突破他发现高分子量的聚乙二醇〔 PEG〕 在Ca2 +存在时能促使植物原生质体融合显著提高融合率从而迅速推动了原生质体技术的基础研究和应用研究。至此应用原生质体和开展操纵它们的方法已引起实验生物学的“无声革命〞。 ,;同时, Pontecorvo 〔 1975 年〕发现PEG能诱导哺乳动物细胞融合并产生杂交细胞。1976 年Davidson等对此作了进一步证实。以后的研究工作说明, PEG不仅可以促使植物、动物、微生物的细胞融合,而且还能促使动物细胞与植物的原生质体发生融合,促使微生物原生质体与动物细胞融合, 使植物原生质体摄入微生物。1975 年Ahkono报道用PEG将母鸡的红血球细胞和酵母菌的原生质体融合成功1976 年Dudus等报道人的细胞能和胡萝卜的原生质体发生融合。Davey 〔 1972 年〕和Vasil〔 1977 年〕用植物原生质体摄取了细菌细胞。 ;1975 年，在动物体细胞杂交技术的基础上又创立了淋巴细胞杂交瘤技术。同体细胞融合一样, 杂交瘤工作早期使用的促融剂——灭活的仙台病毒, 已逐渐为化学促融剂PEG 所取代。Davidson 等于1976年建立的以PEG诱发哺乳类细胞融合的方法, 也同样适用于淋巴细胞同瘤细胞的融合。由于淋巴细胞杂交瘤技术能制备纯度高、专一性强的抗体,适于由未纯化的抗原大量制备,因而在短短几年时间里,即已被广泛用于制备各种单克隆抗体。;PEG诱导细胞融合;PEG作用机制;PEG的最适使用条件;其他影响细胞融合的因素;实验结果： 观察到两个或多个 细胞发生质膜融合 但核尚未融合，有 的则是细胞间不仅 发生质膜融合，而 且细胞核也发生了 融合。 ; 开始进行核融合;分析讨论;实验本卷须知：;新的细胞融合方法;①电脉冲诱导细胞融合技术　 ②激光融合技术 ③空间细胞融合技术　 ④离子束细胞融合技术　 ⑤非对称细胞融合技术　 纵观细胞融合技术的开展历史, 细胞融合技术的不断改进一方面表现在融合剂上, 另一方面表达在新方法上, 再者表达在融合对象的不断扩展上。融合剂走过了从活病毒,灭活病毒生物阶段到PEG 化学物质阶段; 新方法不断涌现, 从生物学, 化学方法,物理学方法过渡到各种方法的综合应用乃至应用空间技术。融合对象从动物,植物到微生物,从种内扩展到种间, 从近缘扩展到远缘。每一次技术上的更新和改进都会带来应用上的巨大革命和创新, 到达为人类服务的目的。;细胞融合技术的应用及开展前景;细胞融合技术的应用PEG诱导细胞融合;细胞融合;细胞融合技术;细胞融合开展史;2.PEG作为促融剂引起的革命、 由于病毒诱导细胞融合存在着病毒制备困难、操作复杂、灭活病毒的效价差异大等原因,科学家们又尝试寻找比病毒简便、快速和高效且比病毒更易制备和控制、活性稳定、使用方便的化学PEG加拿大华裔科学家高国楠等〔 1974 年〕 的研究取得重大突破他发现高分子量的聚乙二醇〔 PEG〕 在Ca2 +存在时能促使植物原生质体融合显著提高融合率从而迅速推动了原生质体技术的基础研究和应用研究。至此应用原生质体和开展操纵它们的方法已引起实验生物学的“无声革命〞。 ,;同时, Pontecorvo 〔 1975 年〕发现PEG能诱导哺乳动物细胞融合并产生杂交细胞。1976 年Davidson等对此作了进一步证实。以后的研究工作说明, PEG不仅可以促使植物、动物、微生物的细胞融合,而且还能促使动物细胞与植物的原生质体发生融合,促使微生物原生质体与动物细胞融合, 使植物原生质体摄入微生物。1975 年Ahkono报道用PEG将母鸡的红血球细胞和酵母菌的原生质体融合成功1976 年Dudus等报道人的细胞能和胡萝卜的原生质体发生融合。Davey 〔 1972 年〕和Vasil〔 1977 年〕用植物原生质体摄取了细菌细胞。 ;1975 年，在动物体细胞杂交技术的基础上又创立了淋巴细胞杂交瘤技术。同体细胞融合一样, 杂交瘤工作早期使用的促融剂——灭活的仙台病毒, 已逐渐为化学促融剂PEG 所取代。Davidson 等于1976年建立的以PEG诱发哺乳类细胞融合的方法, 也同样适用于淋巴细胞同瘤细胞的融合。由于淋巴细胞杂交瘤技术能制备纯度高、专一性强的抗体,适于由未纯化的抗原大量制备,因而在短短几年时间里,即已被广泛用于制备各种单克隆抗体。;PEG诱导