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内皮细胞分离培养鉴定方法及其生物学特性 内陆祖细胞（epcs）在肉芽组织形成、肿瘤血管生长、四肢和心肌缺血过程中形成新血管，促进血液循环和伤口的恢复。目前, 体外分离培养EPCs方法众多, 主要有差速贴壁筛选法、梯密度离心法、流式细胞仪分选法及免疫磁珠分选法等。梯密度离心法和差速贴壁筛选法操作简便, 费用低, 对仪器要求不高, 但细胞纯度相对较低。免疫磁珠法及流式细胞仪分选法能获得纯度较高的EPCs, 但操作较为复杂, 费用也较高, 对细胞有一定的损伤, 分选获得的细胞数量少, 只能针对单一细胞表型, 不能分选多种细胞表型的细胞群, 绝对纯化某一抗原阳性的EPCs必然会丢失另一部分来源的EPCs。此外, EPCs的诱导分化还需要特定的微环境, 可能还需要许多生长因子, 包括细胞之间通过接触传递某种信号或分泌的某些因子。因此, 本实验拟结合梯密度离心法与差速贴壁法分离大鼠骨髓单核细胞, 然后使用内皮细胞专用培养基EGM-2-MV-Single Quots进行体外培养、纯化、扩增并鉴定, 以期为构建组织工程血管、创伤修复、血管新生提供EPCs种子细胞来源。 1 材料和方法 1.1 细胞培养和sq1pe-小鼠、vegfr-2、sch3的抗凝剂、sq-射线pe-小鼠、c-if SD大鼠40只, 雄性, 3~4周龄, 体质量 (84.00±6.13) g, 由中科院上海实验动物中心提供。E