高三二轮复习生物：PCR技术以及应用课件.pptxVIP

PCR技术以及应用 基因工程的步骤1、目的基因的筛选与获取(前提)2、基因表达载体的构建（核心）3、将目的基因导入受体细胞（关键）4、目的基因的检测与鉴定（成功的保证） 作用1、限制酶的作用：3、引物的作用：4、启动子的作用： 5、终止子的作用： 2、标记基因的作用：能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。便于重组DNA分子的筛选使DNA聚合酶能够从引物的3端开始连接脱氧核苷酸???RNA聚合酶的识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA使转录在需要的地方停下来 ----二苯胺试剂----琼脂糖凝胶电泳----PCR、DNA分子杂交----PCR、分子杂交----抗原-抗体杂交鉴定 1、DNA粗提取产物 2、PCR扩增产物 3、染色体DNA是否插入目的基因 4、目的基因是否转录出mRNA 6、转基因生物是否表达遗传特点 5、目的基因是否表达出蛋白质----抗性接种实验 PCR的应用 1、获取目的基因 2、扩增目的基因 3、检测目的基因是否插入到染色体DNA上 4、检测目的基因是否转录出mRNA 5、检测目的基因是否与启动子相连6、基因定点突变7、在目的基因两侧加上限制酶识别序列①目的基因的两端；②限制酶识别序列的外侧 在目的基因上一个引物在启动子，另一个引物在目的基因 改变引物上的碱基（替换、增添、缺失）在引物的外侧（5’端）加上限制酶识别序列