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- 2023-09-09 发布于内蒙古
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;.DNA片段电泳鉴定的原理; 琼脂糖凝胶电泳是分子生物学实验室中分离鉴定核酸的常规方法。核酸是两性电解质,其等电点为pH2-2.5,在常规的电泳缓冲液中(pH约8.5),核酸分子 电荷,在电场中
向 移动。线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比, ,也越难于在凝胶孔隙中移动,因而迁移得越慢。凝胶电泳技术用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。;; 凝胶电泳时用到的标准参照物是DNA标记 (DNAMarker),它含有若干组碱基对数目已知且具有一定梯度变化的DNA片段。DNAMarker和 样本DNA同时进行凝胶电泳,通过对比两者的迁移速率,可以大致估计样本DNA的大小。为了使估计结果更加准确,在凝胶电泳时尽量选择在目标片段大小附近梯度较为密集的DNAMarker。借助 DNAMarker除了能够估计样本DNA的大小之外, 还可以通过对比条带的亮度,粗略估计样品中 DNA的含量。;加样孔→; 考点一、限制酶切割片段的琼脂糖凝胶电泳
1.在DNA测序工作中,需要将某
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