二次正交旋转回归组合设计优化小菜蛾人工饲料配方.docxVIP

二次正交旋转回归组合设计优化小菜蛾人工饲料配方 野生猪小叶刺（l.）是十字花科植物的主要害虫。由于其有害严重、抗药性快速发展和抗逆性强，已成为重要的抗药性、性诱导剂、生物学、病理、药理学、预防和科学控制技术等昆虫的重要实验对象。为了获得大量发育整齐的实验昆虫,优化小菜蛾半合成人工饲料配方,显得尤为重要。Biever Boldt首先用Berger配制的用于饲养Heliothis zea和H.coresoens的饲料饲养小菜蛾;而后Hsiao Hou改进了此配方。然而,这些饲料都是以麦胚为基础的饲料,它们的成分复杂,饲养过程中需更换饲料,不宜大量养虫。Agui等配制了两种饲养甘蓝粘虫(Mamestra brassicae)的饲料,也可用于饲养小菜蛾。这两种饲料都含有大量切碎的甘蓝叶片而不是干叶粉。加入新鲜的物质可能使饲料的效果因不同制品中叶片的含水量不同而变动;另外在没有新鲜叶片的时候,饲料就无法配制。相比较而言,干叶粉在冷藏条件下可保存数月,对配制饲料比较方便。方菊莲等筛选的饲料饲养效果同发芽菜籽相仿,饲养过程中不必更换饲料,简化了育虫管理工作,但饲养的小菜蛾化蛹率仅为54.1%。Ramegowda用芥菜饲养小菜蛾,幼虫历期很长,平均为29.86d。为了得到饲养管理方便,化蛹率高的配方,本文选用菜心(Brassica chinensis)干叶粉为主要原料,应用二次正交旋转回归设计方法对饲料配方进行了优化。 1 材料和方法 1.1 菜粒粉的制备 (1)虫源 从田间采回蛹和成虫,经室内发芽菜苗饲养一代后,采集成虫产卵作为试验虫源。 (2)菜叶粉 于自己种植的田间采集菜心(Brassica chinensis)叶片,洗净,晾干后置60℃烘箱中烘烤,干燥后用植物组织粉碎机磨成粉,过80目筛,装于广口瓶中备用。 (3)麦芽粉 市售麦芽,60℃烘箱中烘烤,干燥后用植物组织粉碎机磨成粉,过80目筛,装于广口瓶中备用。 (4)韦氏盐和维生素混合液的配方参考文献,防腐剂采用尼泊金,饲料的基本成分见表1。 1.2 测试方法 1.2.1 量表的添加量 蔗糖溶解于20 ml水中,再加入尼泊金、氯化胆碱、维生素混合液、氢氧化钾,充分搅拌使其溶解。各成分含量见表1。 称取麦芽粉、干酪素、菜叶粉、螺旋藻、胆固醇、韦氏混合盐,充分搅拌,倒入上述溶液中。 琼脂加入剩余的水中,让饲料总量为100 g,煮熔,沸腾后倒入混合物中,充分搅拌,蒸15min,取出冷至60℃,加入抗坏血酸,拌匀,趁热分装于饲养器中(果冻杯或塑料盒),待其充分冷凝后置于冰箱内(1～4℃)贮藏待用。 1.2.2 幼卵粒及老熟幼虫的采集 幼虫 饲养用的器皿为果冻杯或塑料盒,杯口用保鲜膜封口,用橡皮筋扎紧,保鲜膜上用昆虫针均匀扎孔,孔间距为1 cm左右,待器皿壁上和饲料表面的水气消失后,接入经消毒的卵或用毛笔接入初孵幼虫。小杯接卵10粒或初孵幼虫10头,大杯接卵100 粒或初孵幼虫100头。老熟幼虫在保鲜膜上或果冻杯壁上化蛹,及时收取。 成虫和集卵 羽化的成虫放入养虫笼中(30cm×20cm×15cm ), 笼中用图钉钉上醮有10%葡萄糖液的棉球,在笼内挂一装有菜芯叶片的薄膜袋、袋上插有小孔,让成虫在袋上产卵,每天更换薄膜袋以收集卵。或笼中放一盆发芽菜籽,让成虫在菜苗上产卵,卵孵化后用毛笔接入饲料中。 饲养条件 在人工气候箱中饲养,温度为24～26℃,相对湿度60%～70%,光照周期为13L∶ 11D。 1.2.3 数据分析方法 选择麦芽粉、干酪素、蔗糖、菜叶粉、螺旋藻作为参试因子,参试因子的水平及编码见表2。饲料中其它组分的含量如表1。人工饲料组分影响模型的建立,是根据系统分析的观点采用五因子(1/2实施)二次正交旋转回归组合设计表(表3)。每一参试因子的水平编码为-2,-1,0,1,2,因子的取值采用线性变换。目标函数为化蛹概率。试验基本步骤详细叙述见丁希泉。整个试验设36个饲料配方组合,包括中心点(即编码0水平)的10个重复。中心点的重复变异作为试验误差用于结果的统计分析。以自己种植的新鲜菜心叶片饲养的小菜蛾为对照,每天更换两次叶片。整个试验重复3次。 2 结果与分析 2.1 人工饲料基本组分不同配比对小菜砂化蛹概率的影响 按试验设计不同组分的人工饲料配方饲养小菜蛾的结果如表3。 根据表3的结果,建立的五元二次回归方程描述了不同组分与化蛹概率的关系: Y=0.6833+0.0554x1+0.0321x2+0.0771x3+0.1404x4+0.0013x5-0.0231x1x2+ 0.0581x1x3-0.0306x1x4-0.0019x1x5+0.0044x2x3-0.0094x2x4+0.0169x2x5-0.0031x3x4- 0.0894x3x5+0.0519x4x5-0.0311