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反刍家畜瘤胃微生物蛋白质合成的日粮影响 反刍动物肿瘤胃微生物的合成（或生成）取决于肿瘤胃可用于能量和氮的来源。当氮源充足时，微生物的产生量与肿瘤表面上的有机消化（flm）有关。微生物能量利用率的平均值为27.32g微生物氮和kgfom，但变化非常大，主要受到食物的影响。测定离开瘤胃进入真胃或十二指肠的微生物蛋白质,目前多使用标记物的方法,常用的标记物有核糖核酸(RNA),2,6-二氨基庚二酸(Diaminopimelic Acid,缩写DAPA),嘌呤衍生物,氨基乙膦酸(Aminoethylphenic Acid缩写为AEP),同位素技术35S,15N,32P,其中以RNA和DAPA为普遍使用。 1 材料和方法 1.1 精料添加量的确定 5头分别装有瘤胃和真胃瘘管的绵羊,体重为37.5～41.2 kg,手术后15 d开始实验,用不完全拉丁方设计饲喂7种不同处理的日粮,日粮中精料组成见表1。每隔8 h(7:00,15:00,23:00)饲喂一次,自由饮水,每次饲喂200 g精料和200 g干草(东北羊草),每期实验为15 d。 适应8 d后,改喂带食糜标记物的精料(PEG,Cr2O3分别占精料的1%和0.5%)。 第12～13 d(从早上饲喂前开始)每隔2 h连续48 h真胃收集食糜样品,样品置于低温冰箱保存以备分析。 第14～15 d在饲喂前和饲喂后4 h(一天二次)对瘤胃内容物和瘤胃液进行采样。 瘤胃微生物的分离、瘤胃微生物和真胃食糜中的RNA及DAPA的分析方法见文献,真胃食糜标记物的测定和食糜的计算见文献。 1.2 微生物蛋白质氮合成的效率计算 ①真胃食糜中微生物蛋白氮量的计算: 每天食糜中微生物氮量(M-N)(g)=[总食糜量(kgDM·d-1)×瘤胃细菌N(g/kgDM)×真胃食糜微生物标记物含氮(g/kgDM)]/瘤胃细菌标记物氮量(g/kgDM) ②瘤胃微生物蛋白质氮合成效率的计算: 瘤胃表观可发酵有机物(FOM)=进食有机物-真胃食糜有机物量 瘤胃表观可发酵碳水化合物(FCHO)=进食碳水化合物-真胃食糜碳水化合物 日粮降解氮(RDN)转化微生物蛋白质氮(M-N))的效率=M-N(g·d-1)/RDN (g·d-1) 微生物蛋白氮合成的能量利用效率=M-N(g·d-1)/FOM(kg·d-1) 或M=N(g·d-1)/FCHO)(kg·d-1) 日粮非降解氮(UDN)=总非氨态氮(TNAN)—微生物氮(M-N)(内源氮包括在UDN) 2 结果 2.1 最大周张量法确定微生物氮合成量的方法,用rna作标记物进行检测 RNA作微生物蛋白质氮合成标记物测定微生物蛋白质氮产量时,7种日粮每天到达真胃的微生物蛋白质氮为:豆饼组11.49 g,芝麻粕组9.79 g,大豆粕组10.03 g,花生粕组9.94 g,处理豆饼组10.07 g,黄豆粉组11.65 g,对照组10.46 g;而相应用DAPA作微生物标记物的测定值为:11.48 g,9.83 g,9.60 g,9.89 g,10.24 g,11.10 g,10.40 g(表2)。 从表2可看出,用RNA作标记物测定微生物氮合成量的变异系数较用DAPA作标记物测定的小,RNA作标记物的测定值相对比DAPA作标记物的测定值稳定,从计算日粮非降解氮的变异系数来看,用RNA作标记物测定微生物氮计算非降解氮时,变异系数除处理豆饼组的大于5.00%外,其余均小于5.00%;用DAPA作标记物测定微生物氮时,各组的变异系数见表2。 2.2 dapa和fcho ①瘤胃微生物蛋白质合成的能量利用效率用RNA作瘤胃微生物标记物测定瘤胃微生物蛋白质氮合成时,微生物氮合成效率分别为26.96 gN·(kgFOM)-1,27.26 gN·(kgF-CHO)-1,变异系数分别为10.28%,8.52%。用DAPA相应的值为26.90 gN·(kgFOM)-1,26.96 gN·(kgFCHO)-1,其变异系数分别为10.7%,9.40%(表3)。 从表2,3中看出,用RNA作测定瘤胃微生物蛋白质氮合成的标记物比用DAPA方法变异小,即用RNA较DAPA方法稳定,鉴于这一原因,在下面计算降解氮利用效率时,微生物氮的合成量是用RNA作标记物测定的。 ②瘤胃中日粮蛋白质降解氮转化为微生物氮的利用效率日粮蛋白质降解氮被瘤胃微生物利用合成瘤胃微生物蛋白质氮的效率是0.81,变化范围是0.67～1.03。表4是各实验组和对照组的平均值。 3 国际公策对微生物氮合成的影响 用RNA和DAPA作瘤胃微生物标记物所测定的瘤胃微生物蛋白质氮的能量合成效率结果相似,分别为27.4 g和26.9 g M-N/kg FOM,这与其他研究学者报道的结果有很大的不同。普遍认为用RNA微生物标记物方法估测瘤胃微生物时测定值较