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3.1重组DNA技术的基本工具
【教材课后习题】
1. DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是 ()
A. 能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
B. 能将单个脱氧核昔酸加到DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
C. 能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段,重新形成磷酸二酯键
D. 只能连接双链DNA片段互补的黏性末端,不能连接双链DNA片段的平末端
2. 在重组DNA技术中,将外源基因送入受体细胞的载体可以是 ()
A.大 杆菌的质粒 B.切割DNA分子的酶
C.DNA片段的黏性末端 D.用来识别特定基因的DNA探针
3. 想一想,为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子?
4. 有2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶SPe I进行切割,B片段分别用
限制酶HindUL Xbal、EcoRV和Xhol进行切割。各限制酶的识别序列和切割位,
点如下。
Sp e\ 5*-ACTAGT-3»
31 —TGATCA—5
Hind IH 5 —AAGCIT— 3
31—TTCGAA—5*
♦ 1
Xbal 5r—TCTAGA—3
31—AGATCT—51
+
I
EcoR V 5r —GATATC —3
3‘一CTATAG—5
♦
Xho I 5—CTCCAG — 3’
31—GAGCTC—5r
(1)哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶SPe I切割A片段产生的
DNA片段相连接?为什么?
(2 )不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端,这在基因工程操作中有什么意义?
【定点变式训练】
5. 下列关于基因工程中限制酶的叙述,正确的是 ()
A. 限制酶广泛存在于各种生物中,所有限制酶的切割位点都相同
B. 基因工程中所使用的工具酶就是限制酶,其活性受温度影响大
C. 大多数限制酶能识别由6个核甘酸组成的序列
D. 限制酶的识别序列越长,该序列在DNA 中出现的概率就越大
6. 下列关于基因工程工具的说法不正确的是 ()
A. DNA连接酶与限制酶均受温度、pH等因素的影响
B. DNA连接酶对所连接的DNA两端的碱基序列有专一性要求
C. 运载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达
D. 在基因工程操作中,被用作运载体的质粒一般都是经过人工改造的
. DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是 ()
A. E.co 〃DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端,也能连接平末端
B. DNA连接酶连接的是两条单链上的磷酸和脱氧核糖
C. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键
D. DNA连接酶可以将单个的脱氧核甘酸连接到主链
8. 以下关于基因工程操作工具的叙述,正确的是 ()
A. DNA连接酶能够催化核糖核甘酸之间形成磷酸二酯键
B. 限制酶能识别并切割DNA分子内一段特定的核昔酸序列
C. 质粒一般具有复制原点、酶切位点和抗生素合成基因等
D. DNA聚合酶可将目的基因和载体连接形成重组DNA
9. 关于如图所示黏性末端的说法,正确的是 ()
AATTC AATTG -b mAG
G C C
甲 乙 丙
A. 甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的
B. 乙中的酶切位点在A与G之间
C. 如果甲中的G突变为A,则该限制酶不能识别图甲所示的序列
D. 构建基因表达载体所用的限制酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处
10. 下列关于载体的叙述中,错误的是 ()
A. 载体与 目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子
B. 在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工
改造的
C. 目前常用的载体有质粒、入噬菌体的衍生物和动植物病毒等
D. 载体具有某些标记基因,便于对其进行切割
11. 下列有
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