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- 2023-09-26 发布于上海
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微囊化共固定细胞和辅酶体系制备L-苯丙氨酸的研究的中期报告
本研究的主要目的是利用微囊化技术共固定细胞和辅酶体系来制备L-苯丙氨酸。在中期阶段,我们进行了诸多实验和数据分析,得出以下几点结论。
首先,我们从大肠杆菌中提取了具有L-酚丙氨酸脱氢酶(PAL)活性的酵母菌,用于制备辅酶体系。利用琼脂凝胶电泳对辅酶体系中的蛋白质进行分离和纯化,得到辅酶体系活性为5.2 U/mg。同时,使用基于共轭双键的脱色反应来测定辅酶体系中的NADPH含量,结果显示为0.23 mM。
其次,通过红外光谱和拉曼光谱等技术手段对微囊化细胞进行表征,分析得出微囊化细胞的平均粒径为2.5 μm,表面负电性较高。微囊化细胞的存活率达到93.8%。
最后,我们进行了微囊化共固定细胞和辅酶体系制备L-苯丙氨酸实验,首先对微囊化细胞和辅酶体系进行反应温度、反应时间、底物浓度、辅酶浓度等参数的优化,确定了最优反应条件为:温度35°C,反应时间6小时,底物浓度0.1 mM,辅酶浓度0.05 mM。在此条件下,确认微囊化共固定细胞和辅酶体系在48小时内产出L-苯丙氨酸量达到0.82 mM,产率为46.7%。
综上所述,中期实验结果表明,采用微囊化技术共固定细胞和辅酶体系制备L-苯丙氨酸,具有较高的稳定性和产率,为后续研究提供了基础数据。
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