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人血管内皮生长因子165基因慢病毒载体的构建及转染人胚胎神经干细胞的中期报告
本研究旨在构建人血管内皮生长因子165基因(VEGF165)慢病毒载体,并将其转染到人胚胎神经干细胞(hESC)中,以研究其对神经干细胞增殖与分化的影响。
首先,我们从hESC中提取RNA,经过逆转录PCR扩增得到VEGF165基因的cDNA。然后,将其克隆进入慢病毒载体pLenti-GIII-CMV-GFP-2A-Puro 中,构建了VEGF165慢病毒载体。
接着,通过慢病毒感染剂将VEGF165慢病毒载体转染到hESC中,成熟后观察细胞中绿色荧光蛋白表达情况,证明病毒已转染到细胞中。同时,还使用实时荧光定量PCR检测VEGF165表达水平,发现其表达量较未转染组显著升高,表明VEGF165成功转染到hESC中。
下一步,我们将对VEGF165转染后的hESC进行增殖和分化实验,进一步研究VEGF165对神经干细胞的影响。
总之,本研究成功构建了VEGF165慢病毒载体,并将其转染到hESC中,为下一步研究神经干细胞增殖与分化提供了基础。
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