甘油和甘露醇溶液对白光狗鱼精子活力的影响.docxVIP

甘油和甘露醇溶液对白光狗鱼精子活力的影响 eso鹿犬是国内外重要的亚冷水性经济鱼类之一。在中国，白色狗只分布在新疆的额尔齐斯河系统中。近年来白斑狗鱼的天然资源受水利工程建设、过度捕捞等因素的影响，出现了衰减的趋势。为了保护该鱼的自然资源和满足人工养殖的需要，研究了不同浓度下甘油和甘露醇溶液对白斑狗鱼精子活力影响，旨在为白斑狗鱼人工繁殖时精子稀释液和保存液的配制提供科学依据。 1 材料和方法 1.1 精液的采集 白斑狗鱼采自新疆福海县，体重430～1600 g，性腺发育到Ⅴ期。 精液采集时先擦干亲鱼体表水分，轻挤鱼腹部获取精液。精液应呈乳白色、黏稠，无尿、血、粪便污染。 1.2 溶液渗透率浓度的确定 甘油和甘露醇均为分析纯。用双蒸水配制成不同渗透压浓度的试剂。将甘油和甘露醇的溶液渗透压浓度初步设为0、200、400、600和800 kPa。根据试验当天的实际温度（12.4℃）得出校正后的渗透压分别为0、205、411、616和821 k Pa，为5个试验组。 1.3 精子在不同水溶液中的生长 载玻片上加一滴试剂，用洁净牙签挑取少许精液与其混合，即刻移至10×40倍显微镜下，依次完成对同尾亲鱼精子在不同渗透压的同种溶液中的活动观测。观察以一个视野为准。当精液与试剂相混时，立即用秒表开始计时。精子的快速运动时间（FT）和寿命时间（LT）的确定参照严安生的方法。 2 结果 2.1 甘油溶液初始渗透 在0～411 kPa甘油溶液中，白斑狗鱼精子的FT是随着甘油溶液渗透压的升高而增大的，205 kPa组和411 kPa组FT分别高于0 kPa组FT的44.6%和95.3%。当甘油溶液渗透压在411 kPa和616 kPa时，白斑狗鱼精子的FT趋于平稳，616 kPa组FT仅比411kPa组FT高出2.6%，此时白斑狗鱼精子的FT达到最高值85.01±5.09 s。在甘油溶液渗透压为821 kPa时，白斑狗鱼精子的FT逐渐减小至42.40±12.42 s（表1）。 白斑狗鱼精子的LT随甘油渗透压变化的情况与FT随着甘油渗透压变化的情况基本是一致的。随着甘油溶液渗透压的升高，白斑狗鱼精子的LT也呈现出升高、走平、下降的规律。205 kPa组、411kPa组和616 kPa组的LT依次高于0 kPa组LT28%、56.8%和79.8%。当甘油溶液渗透压达到411k Pa和616 kPa时，白斑狗鱼精子的LT达到最高值116.12±7.39 s。821 kPa组LT低于616 kPa组LT（表2）。 2.2 价值生长和各类过程对白蛋白狗鱼精子ft和ft的影响 在0～411 kPa甘露醇溶液中，白斑狗鱼精子的FT是随着甘露醇溶液渗透压的升高而增大，205kPa组和411 kPa组FT分别高于0 kPa组FT23.5%和72.0%。当甘露醇溶液渗透压在411～616kPa时，白斑狗鱼精子的FT趋于平稳，616 kPa组FT仅比411 kPa组FT下降3.2%，此时白斑狗鱼精子的FT达到最高值75.59±3.67 s。以后随着甘露醇溶液渗透压升高，白斑狗鱼精子的FT逐渐减小至33.23±10.60 s（表3）。 白斑狗鱼精子的LT随甘露醇渗透压变化的情况与FT随着甘露醇渗透压变化的情况基本是一致的。随着甘露醇渗透压的升高，白斑狗鱼精子的LT也呈现出升高、走平、下降的规律。205 kPa组LT为77.93±4.72略低于84.33±31.94的0 kPa组，t检验显示差异不显著。411 kPa组和616 kPa组的LT分别高于0 kPa组23.29%和42.69%。当甘露醇溶液渗透压达到411～616 kPa时，白斑狗鱼精子的LT达到最高值120.33±17.27 s,821 kPa组LT比616kPa组低60.9%（表4）。 3 讨论 3.1 精子活动的影响 鱼类精子在精巢或精液里是不活动的，然而却具有很强的潜在运动能力。当排出精子时，精液会进入水环境，这时精子就会瞬间活动起来。这说明水中有激活精子活动的因素，精子在精巢或精液中有抑制精子活动的因素。Moriswa等认为精浆中比血浆高出多倍的钾离子时抑制鲑科鱼类精子激活的因素，并不是渗透压。 3.2 渗流对海胆的影响 单糖物质在维持精子活动中的作用是十分明显的，葡萄糖、果糖虽同为单糖，但他们对延长精子活力的作用已不是完全由渗透压一个因素所决定的，而是与溶质的性质密切相关。苏德学发现适宜浓度的葡萄糖可以明显延长白斑狗鱼精子活动时间，最适渗透压在339.8 kPa左右。试验研究发现甘露醇最适渗透压在411～616 kPa，与上述试验最适渗透压略有差异。虽然甘露醇和葡萄糖同属单糖类物质，但因具体物质的不同，从而导致最适渗透压略有不同。另外鱼类的品种及外部环境等也会导致渗透压的不同。因此，在实际生产过程中要根