DNA免疫制备猪传染性胃肠炎病毒S基因单克隆抗体和特性分析的中期报告.docxVIP

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DNA免疫制备猪传染性胃肠炎病毒S基因单克隆抗体和特性分析的中期报告 中期报告: 本研究旨在制备基于DNA免疫的猪传染性胃肠炎病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)S基因单克隆抗体,并对其进行特性分析。 首先,我们将PEDV S基因的C端部分(大约1500个氨基酸残基)克隆到表达载体中,并把该载体导入细胞中进行表达。然后,我们使用该表达蛋白作为抗原,即DNA免疫的靶点,注射BALB/c小鼠进行免疫。继续免疫直到获得满意的免疫效果。 随后,我们收集小鼠脾细胞并与SP2/0细胞进行融合。使用渐进稀释法,在96孔板中进行克隆。鉴定单克隆抗体的方法是通过ELISA检测抗体的反应性,并通过Western blotting检测抗体的特异性。 我们筛选出了5株单克隆抗体,其中4株为抗PEDV S1亚型,1株为抗PEDV S2亚型。用Western blotting展示这些单克隆抗体的特异性,对PEDV病毒进行了检测。结果表明,这些单克隆抗体能够特异性地识别PEDV S蛋白,而不与其他细胞蛋白发生反应。此外,我们还进行了其它特性分析,包括对抗体亲和力的测定和免疫组化检测等。 综上所述,我们成功地制备了一些特异性的PEDV S基因单克隆抗体,并对其进行了特性分析。这些抗体具有潜在的应用价值,如用于PEDV的诊断和治疗。下一步,我们将进一步优化这些单克隆抗体的制备和特性,并探讨更多的应用领域。

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