基因工程的基本操作程序(精华).pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 三、将目的基因导入受体细胞 1. 什么是转化？ ——目的基因进入受体细胞内，并且在 受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的受体细胞： ——大肠杆菌、枯草杆菌、农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 3.将目的基因导入受体细胞的原理： ——借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 本文档共60页；当前第30页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 4. 将目的基因导入植物细胞： ①适用范围： (1)农杆菌转化法： ——双子叶植物和裸子植物。 小知识：植物的分类 依据是否形成种子 种子植物 裸子植物：松、杉、柏、银杏 被子植物 双子叶植物：花生、大豆 单子叶植物：水稻、玉米 孢子植物 藻类植物：衣藻、水绵、海带 苔藓植物：葫芦藓、地钱 蕨类植物：肾厥、满江红 本文档共60页；当前第31页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 4. 将目的基因导入植物细胞： ②农杆菌特点： (1)农杆菌转化法： ——在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。当植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。 本文档共60页；当前第32页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 4. 将目的基因导入植物细胞： ③转化过程： (1)农杆菌转化法： 本文档共60页；当前第33页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 4. 将目的基因导入植物细胞： (2)基因枪法： 适用范围： ——适用于单子叶植物，但成本较高。 本文档共60页；当前第34页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 4. 将目的基因导入植物细胞： (3)花粉管通道法： 适用范围： ——适用于被子植物，且十分简便经济。 胚珠 花药 花丝 柱头 花柱 子房壁 子房 雄蕊 雌蕊 本文档共60页；当前第35页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 5. 将目的基因导入动物细胞： (1)导入方法： ——显微注射法。 (2)过程： ——目的基因表达载体提纯→从雌性动物内取出卵(卵在体内或体外受精)并进行显微注射→ 含目的基因的受精卵→胚胎早期培养至囊胚期再移植到雌性动物输卵管或子宫，使其发育成具有新性状的动物。 本文档共60页；当前第36页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 6. 将目的基因导入微生物： (1)原核生物特点： ——繁殖快、单细胞、遗传物质少。 (2)方法： ——用Ca2+处理细胞→感受态细胞表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子。 本文档共60页；当前第37页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 知识拓展： (1)不同生物的受体细胞不同：植物一般为体细胞(也可以受精卵)，动物一般为受精卵，微生物一般为大肠杆菌。 (2)上图中发生②与发生①相比，②会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，原因是在进行细胞分裂时，细胞核上的DNA经复制后平均分配到两个子细胞中，保证了亲子代遗传性状的稳定性，而①细胞分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。 本文档共60页；当前第38页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 练一练： 1.基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，主要原因是( ) A．结构简单，操作方便 B．繁殖速度快 C．遗传物质含量少、简单 D．性状稳定,变异少 B 2.在培育下列作物的转基因品种时，适合用农杆菌转化法导入目的基因的是( ) A．小麦 B．玉米 C．大豆 D．水稻 C 本文档共60页；当前第39页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 练一练： 3.采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是( ) ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导人细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵 A.①② B.②③ C.③④ D.④① C 本文档共60页；当前第40页；编辑于星期二\12点27分 三、将目的基因导入受体细胞 练一练： 4.回答有关基因工程的问题： (1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生___