食品加工环境沉降菌的测试方法.pdfVIP

食品加工环境（洁净区）沉降菌的测定方法 1　范围 本标准规定了食品检测和食品加工环境（洁净区）中沉降菌测试条件、测试方法。 本标准适用于食品检测机构和食品生产企业洁净室、洁净区以及局部空气清洁作业区 (包括洁净工 作台)的沉降菌的测试和环境的验证。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 16294 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 3　术语和定义 3.1　沉降菌 将培养皿暴露在环境中，收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁 殖到可见的菌落数。 3.2　沉降菌菌落 规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。 4　测试方法 4.1　测试原理 本方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适 宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数， 并以此来评定洁净室(区)的洁净度。 4.2　人员职责及培训 洁净室 (区)的测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能履行对洁净室(区)测试的职责， 其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室(区)的测试人员应选择与测试环境的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不 能带进100000级以上的区域。 4.3　仪器设备与培养基 4.3.1　培养皿 一般采用φ90mm×15mm规格的培养皿。 4.3.2　恒温培养箱 必须定期对培养箱进行校准。 4.3.3　培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或平板计数琼脂培养基（PCA），配制方法见附录A或选择商品化培 养基。 4.3.4　高压蒸汽灭菌器 4.4　测试步骤 4.4.1　采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服进入测试区域，双手用 75%酒精消毒或戴无菌手套 操作。 4.4.2　采样前，培养皿表面先用 75%酒精严格消毒。 4.4.3　将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表 面暴露在空气中。 4.4.4　静态测试时，培养皿暴露时间为 30 min 以上；动态测试时，培养皿暴露时间为不大于 4h。 4.4.5　全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 4.5　培养 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中于36±1℃培养48h。每批培养基应有对照试验，检 验培养基本身是否污染。可每批选定1只培养皿作对照培养。 4.6　菌落计数 4.6.1　用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，必要时用 5～10 倍放大 镜检查，有无遗漏。 4.6.2　若平板上有 2 个或 2 个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2 个或 2 个以上菌落计数。 4.7　注意事项 4.7.1　使用前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 4.7.2　测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 4.7.3　采取一切措施防止人为对样本的污染。 4.7.4　对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 4.7.5　由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察不要漏计培 养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5　测试规则 5.1　测试状态 静态和动态两种状态均可进行测试。测试前，被测洁净室 (区)由用户决定是否需要预先消毒。测试 报告中应标明测试时所采用的状态和室内测试人员数。 5.2　测试条件 在测试之前，要对洁净室 (区)相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试沉降菌的环境条件， 例如：这种预先测试或可包括： a) 温度和相对湿度的测试。洁净室 (区)的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应(无特殊 要求时，温度在18℃～26 ℃,相对湿度在45%～65%为宜),同时应满足测试仪器的使用范围； b) 室内送风量或风速的测试，或压差的测试； c)高效过滤器的泄漏测试。 5.3　测试时间 测试前，先启动净化空气调节系统，若为单向流洁净室 （区），系统运行时间不少于 10min；若 为非单向流洁净室（区），系统运行时间不少于 30min 。对于预先消毒的测试室进行测试，先打开 紫外灯，30min 后关闭紫外灯，等待 30min 后可进行测试