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本文档共50页;当前第30页;编辑于星期三\2点0分 2.3 DNA的复制 一. DNA复制的基本条件: 模板、dNTP、RNA引物、酶等。 二. DNA复制的特点: 1.半保留复制 2.半不连续复制 3.复制起点固定 三. DNA复制的主要方式: 1.线性DNA双链的复制 2.环状DNA双链的复制 本文档共50页;当前第31页;编辑于星期三\2点0分 ①拓扑异构酶( Topoisomerase):主要功能是消除DNA解链过程中所 产生的扭曲力。 ②解链酶(Helicase):将DNA母链不断解开形成单链。 ③单链结合蛋白(SSB):使新解链的DNA保持稳定结构。 DNA复制时的一些重要酶和蛋白质 本文档共50页;当前第32页;编辑于星期三\2点0分 ④引物酶(Primases):为DNA复制提供RNA引物。 ⑤DNA聚合酶( polymerases):合成新生DNA链,切除RNA引物。 ⑥DNA 连接酶(Ligases):使新生DNA链上的缺口(3'- OH,5′- p) 生成磷酸二酯键。 本文档共50页;当前第33页;编辑于星期三\2点0分 二. DNA复制的特点 1958年Meselson 和Stahl所做的实验: 15N标记培养基,CsCl离心密度标记(0);14N培养基培养3代。 1.半保留复制 本文档共50页;当前第34页;编辑于星期三\2点0分 1.新链同时合成方向5’? 3’ 2. 前导链, 滞后链{冈崎片段 1000bp~2000bp (大 肠杆菌), 100~200bp (真核生物)} 3. RNA引物 的合成; DNA链的延伸; 引物的切除, 缺口补平, 连接. 半不连续复制 本文档共50页;当前第35页;编辑于星期三\2点0分 分子生物学染色体与详解演示文稿 本文档共50页;当前第1页;编辑于星期三\2点0分 优选分子生物学染色体与 本文档共50页;当前第2页;编辑于星期三\2点0分 2.11 原核生物基因组 1) 结构简炼 序列利用率高, 不转录序列<5%,不编码的序列也为调控序列 2)存在转录单元 操纵子 和 多顺反子* (注意与蛋白前体的区别) 3)连续基因 本文档共50页;当前第3页;编辑于星期三\2点0分 2.12 真核生物基因组 染色体 (Chromosome) (1) 单一序列和低度重复序列 (各种基因) 中度重复序列 (rRNA, tRNA, 结构基因) 高度重复序列 (卫星DNA) 编码基因的DNA所占比例很小, 功能? 本文档共50页;当前第4页;编辑于星期三\2点0分 (2) 不连续基因 内含子和外显子 (3)多倍体 * C值反常现象(C-value paradox) C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。 高等生物一般C 值高于低等生物,但有例外。即C值反常现象。两栖类比哺乳类高。(真核生物含有大量的重复DNA是原因) 本文档共50页;当前第5页;编辑于星期三\2点0分 (4)形成核小体?染色体( 染色质) * DNA 1 * RNA 0.1 * 蛋白质 组蛋白 1 (H1 H2A H2B H3 H4) 非组蛋白 0.6 注意: 原核, 真核基因组都是由双链DNA构成. 本文档共50页;当前第6页;编辑于星期三\2点0分 组蛋白的一般特性 (1) 进化上的保守性 (2) 无组织特异性 (3) 肽链氨基酸分布的不对称性 碱性氨基酸分布在N端的半条链上. 如N端的静电荷为16+,C 端仅3+;碱性半条链与DNA负电荷区结合,另半条链与其他蛋白结合。 (4) 组蛋白的可修饰性 在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍,H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。 本文档共50页;当前第7页;编辑于星期三\2点0分 非组蛋白的一般特性 (1) 多样性 (有30~600种) (2) 组织特异性 (3) 种属特异性 本文档共50页;当前第8页;编辑于星期三\2点0分 串珠模型 DNA+组蛋白 核小体 螺旋体(30nm fiber) 超螺旋体(300nm loop) 染色体 (人类总DNA长度=180cm) 146bp, 八聚体, 1.75圈, 缩短7倍 螺旋化,缩短6倍 进一步螺旋化,
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