no和co与神经内分泌轴的生物递质.docxVIP

no和co与神经内分泌轴的生物递质 根据过去10年的发现，毒性污染药物（noc）可在人体产生并作为重要的信号分子，与身体上的神经传输、免疫防御、血管扩张和内经一样重要。作为神经递质, NO和CO与目前确定的经典递质不同。因为, ①它们不能储存在突触小泡。②突触不能限制它们的活动。③它们不能与经典受体蛋白相互作用。相反, 作为扩散性气体它们的产生需要特殊的酶, 扩散并结合到邻近的神经元, 调节血红素酶系, 鸟甘酸环化酶, 环氧化酶, 从而调节细胞的特殊功能和反应。虽然, NO和CO参与了人体内的记忆, 免疫监视, 血管扩张等生理过程, 但本文将着重讨论作为新型信号分子和生物递质的NO和CO在神经内分泌调节中的意义。 1 no和co系统 1.1 nos异构体基因 NO经NOS作用由L-精氨酸底物生成。目前已确定三种主要的NOS:神经元性NOS (n-NOS) , 巨噬细胞性NOS (m-NOS) 和内皮细胞性NOS (e-NOS) 。NOS异构体基因位于三条不同的人类染色体上。e-NOS位于第7染色体上有26个外显子21Kb。n-NOS位于第12染色体上有28个外显子100Kb。而m-NOS位于第17染色体上有26个外显子37Kb。n-NOS和e-NOS是钙和钙调蛋白依赖性组成酶。m-NOS是钙和钙调蛋白非依赖性诱导酶。所有NOS异构体需要四氢叶酸, FMN, FAD和NADPH作为辅助因子才可具有完全活性。含有组成NOS异构体的组织对各种刺激可迅速及时地产生少量NO。相反, 由诱导性m-NOS合成的NO将延迟几小时。 1.2 养老增生对n-nos活性的影响 近来工作显示存在着调节n-NOS功能的其它蛋白。Jaffer等用双信号杂交筛选法确定了一种10-kd的蛋白, 命名为PIN。它们可与n-NOS相互作用并抑制其活性。n-NOS第163-245氨基酸与PIN结合使n-NOS二聚体不稳定从而抑制n-NOS活性。由于e-NOS和m-NOS缺少与PIN结合结构域, 所以PIN不能与e-NOS和m-NOS结合, 而特异的与n-NOS结合。Northern blot分析说明在睾丸里有高水平0.9kb PIN的转录物, 在大脑里中水平, 在外周组织最低。是否PIN受类固醇激素, 神经递质, 和其它神经内分泌因子的调节还不清楚。 1.3 psd-33 Bremen等认为NOS与突触后密度蛋白潜在的相互作用在细胞膜连接处对信号传导有重要意义。用双信号杂交筛选法在106质粒中筛选确定了两种n-NOS结合蛋白。一种为突触后蛋白PSD-95, 而另一种为新型蛋白PSD-93。PSD-93和PSD-95含由PDZ结构域。n-NOS的N-末端也含PDZ结构域可与PSD-93和PSD-95中的相同基序相互作用。因而n-NOS能同这些蛋白结合。更有意义的是PSD-93和PSD-95可与N-甲基-D-天冬氨酸 (NMDA) 受体结合, 而NMDA受体在大脑里是n-NOS活性的主要刺激因子。既然PSD-93和PSD-95每个都含与NMDA受体和n-NOS结合潜在的多结合位点, 含有PSD-95/93寡聚合物的复合体也许有助于n-NOS和NMDA受体偶联, 从而为神经递质受体与信号传导机构的偶联提供了一种新机制。 1.4 nos在gnrh神经元/免疫组化中的表达 在大鼠和小鼠的嗅泡, 杏仁复合体, 海马回嗅觉小岛和小脑呈NOS免疫染色强阳性;大脑皮层, 海马和纹状体神经元细胞轻度染色。用放射配体法研究[3L]-NG-精氨酸特异与n-NOS结合, 显示n-NOS在大脑的相同定位模式。已有报道大鼠和人的垂体前叶和蓝斑儿茶酚胺细胞体呈n-NOS阳性。关于下丘脑, NADPH-硫辛酰胺脱氢酶染色显示大量NOS位于室旁核 (PVN) , 视上核 (SON) 。中度NADPH-硫辛酰胺脱氢酶染色位于内侧视前核 (MPN) , 腹侧正中核 (VMN) 和中央隆起 (ME) 。轻度染色位于内侧视前区 (Mpoa) 和弓状核 (ARC) 。关于哪种NOS异构体在下丘脑中占主导, Bhat等用免疫染色研究发现在成年雌性大鼠下丘脑中有大量n-NOS而e-NOS和m-NOS很少。但是, 大脑损伤或感染后, 大脑和下丘脑可诱导m-NOS mRNA和蛋白形成。“敲掉”e-NOS基因而小鼠下丘脑中NOS的活性正常, 但“敲掉”n-MOS基因则NOS的活性显著降低的研究再次支持了n-NOS是在下丘脑中负责产生NO主要的NOS异构体。NOS位于下丘脑室旁核和视上核大多数的催乳素神经元, 在少部分加压素和CRH神经元中也存在NOS。在体外, 永生化的GnRH神经元含有m-NOS mRNA和蛋白, 但在体内免疫染色无显示。大鼠视前区的GnRH神经元由NOS染色阳性的神经元包绕, 提示在体内NO可能通