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纯钛种植体表面经微弧氧化工艺处理后的成骨效能 自半个世纪以来，纯钛材料在植物的临床应用中发挥着良好的作用，具有良好的骨生物适应性、耐腐蚀性和易于加工的财务费用。它可以与骨组织形成一定程度的骨结合（osetintigra），并以各种优点（如黑面包面动物植物）形成口腔栽培。主要以基本材料为基础。但在不断的使用研究中发现, 纯钛种植体的表面生物活性差, 缺乏骨诱导作用, 与周围骨组织难以形成强有力的化学性结合而成为口腔医学种植领域中一直未能解决的难题之一。同时在人体生理环境中及负载条件下纯钛种植体的耐磨性较差, 并且容易向周围组织内释放金属离子形成比较明显的金属腐蚀圈, 这些缺点都严重的影响了钛种植体的临床成功率, 并明显制约了种植技术的广泛开展。持续性的研究显示:由于与周围组织发生金属反应的相互作用区主要在种植体表面, 因此如何通过种植体表面改性的方法, 改善钛及其钛合金的耐磨性、耐腐蚀性, 并着重增大增强纯钛种植体表面的生物活性, 进而提高种植体的骨结合强度, 缩短愈合时间则成为口腔种植学领域里研究的热点课题。因而最近人们开始在种植体研究中尝试开展新的表面改性方法, 使钛及钛合金植入材料表面具备有良好的生物活性, 从而能得以增强纯钛种植体的早期或即刻承重力, 最终达到牢固的骨愈合。 微弧氧化 (Micro-arc Oxidation, MAO) 全称等离子体微弧氧化, 它是一种直接在有色金属表面原位生成陶瓷层的新技术。将AL、Mg、Ti等金属样品放入电解质溶液中, 通电后, 金属表面立即生成很薄的一层金属氧化物绝缘膜。在微弧氧化过程中溶液中电解质离子不仅起导电作用, 还要参与微弧放电区的物理化学反应, 进入氧化膜层中。因此可以利用这一现象可以将Ca、P元素引入到钛氧化膜中。其氧化产物是一种多孔状, 与基质结合牢固、具有陶瓷特性的氧化膜。因此利用微弧氧化技术处理纯钛种植体后可以得到富含钙磷元素, 表面疏松多孔, 并逐渐向与基体结合牢固的致密氧化层过渡, 具有一定梯度分布的复合二氧化钛膜表面。其物理、化学特性与微弧氧化处理时电参量的选择、电解液的配方以及样品自身的特性有关, 经微弧氧化工艺处理的种植体与原材料基质本身相比, 其耐磨、耐腐蚀、电绝缘等性能都得到明显改善。本实验利用微弧氧化技术工艺构建出一种新的粗化、活化的纯钛基体二氧化钛膜表面, 并且检测观察其表面性状, 进而再采用体内和体外实验检测评定其生物相容性和成骨效能。 1 材料和方法 1.1 试验组和方法 纯钛组 (华南理工大学材料学院提供) 为对照组, 微弧氧化组 (将对照组的纯钛种植体经微弧氧化工艺处理) 为试验组, 均制备成长为10 mm, 直径为4 mm的圆柱状种植体。 1.2 先锋vi小瓶消毒 两种不同的种植体共36枚, 经丙酮超声清洁5 min, 无水乙醇超声清洁5 min, 去离子水清洗后, 密封包装于洁净的先锋VI小瓶中高压蒸气消毒后备用。 1.3 分组及命名 将9只成年Beagle犬 (中山大学动物实验中心提供) , 雌雄不拘, 平均体质量在10～12 kg, 随机分配到甲、乙、丙3个组 (对应取材时间为4、8、12周) , 每组3只, 组内分别编号为1、2、3。每只犬下颌可以植入4颗种植体 (左右侧各两颗) , 每只试验动物左, 右两侧分别种入纯钛和微弧氧化两种种植体。 1.4 骨髓细胞处理 采用体积分数为3%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉, 剂量为30 mg/kg体质量。实验Beagle犬仰卧位位于手术台, 固定头部四肢。术区消毒 (以体积分数为0.1%的新洁尔灭行口腔内消毒, 面部以体积分数为3%的碘酒, 体积分数为75%的酒精消毒) , 铺巾。 严格遵守外科无菌操作技术, 沿下颌骨下缘切开皮肤, 钝性分离皮下组织肌肉, 充分暴露下颌骨。位于左下颌第一磨牙下方球钻定位第一种植位置, (第二位置在第一位置近中1 cm处) , 扩孔钻逐级扩大种植钉孔, 钻时以生理盐水持续冷却, 以防止骨灼伤。最后完成洞深约10 mm, 直径约为4 mm。钻孔时尽量使钉洞方向保持平行并注意防止颊舌侧穿。严密缝合粘骨膜瓣。术中补液200 mL糖盐+先锋Ⅵ1 g。术后3日连续每天肌注2g/d, 连续一周半流饮食。每天清洗伤口, 一周后拆线, 改普食。动物圈养于中山大学动物实验中心。 分别于4、8、12周氯安酮肌注麻醉动物后用气栓法处死动物, 截取下颌骨标本固定于体积分数为4%的多聚甲醛液。 手术刀、镊子、组织剪、持针器、止血钳、骨膜剥离器、不锈钢直尺, 牙周探针、BLB种植工具、牙科专用微型电机。 1.5 种植体骨结合力的测定 观察术后试验动物的麻醉清醒情况, 饮食情况, 行动情况。每天清洁伤口一次, 观察伤口愈合情况, 检查种植区有无感染情况。检查双侧下颌区有无肿大淋巴结。 取材