肺炎支原体明胶颗粒凝集试验及其临床应用课件.pptxVIP

肺炎支原体明胶颗粒凝集试验及其临床应 用 肺炎支原体 明胶颗粒凝集试验 及其临床应用 成都市中西医结合医院 检验科 杨溪霖 2 直 径 50-300 nm 、无细胞 壁，能通过细菌滤器 肺炎支原体的 一 端有 一 种特殊 的末端结构 (terminal structure ), 能使支原体粘 附于呼吸道粘膜上皮细胞表面， 与致病性有关。 肺炎支原体 (mycoplasmsa pneamoniae,MP) 3 肺炎支原体肺炎 肺炎支原体肺炎又称原发性非典型性肺炎 支原体肺炎全年均可发病，以秋冬季多见。它由 急性期患者的口、鼻分泌物经空气飞沫传播，引 起呼吸道感染。其发病主要与室内活动增加及密 切接触有关。支原体感染也可表现为咽炎、气管 支气管炎 4 ·潜伏期1-3周 ·起病形式多样，多数 患者仅以低热、疲乏 起病 ·部分患者可以突发高 热并伴有明显的头痛 、肌痛、恶心等全身 中毒症状 ·呼吸道症状以干咳最 突出，常持续4周以 上，多伴有显著咽痛 ,偶有胸痛、痰中带 血； ·呼吸道以外的症状中 ,以耳痛、麻疹样或 猩红热样皮疹较多见 · 阳性体征以显著的咽 部充血和耳鼓膜充血 较多见 外周血白细胞总数和 中性粒细胞比例多正 常，有些患者可升高 临床表现及实验室检查 常用方法 1 .冷凝集试验 2. 补体结合试验(CFT) 3. 间接血凝试验(PHA) 4. 明胶颗粒凝集试验(PA) 5. 酶联免疫吸附试验 (ELISA) 6. 金标快速检测 7. 其它方法：间接免疫荧光试验 (IFA)、 乳胶凝集试验 (LA)、 免疫印迹测定 (WB)、 黏附抑制试验、放射免 疫沉淀试验、补体介导的杀伤试验等 6 常用方法比较 冷凝集试验：冷凝集素是对Mp 最早的体液反应，50%的病人 在Mp 感染第2周时的滴度可达到1:32以上，而6周内即降至感 染前的水平。冷凝集试验虽然简便、快速，但它不是针对Mp 的 特异性试验，多种其他微生物感染(如EB 病毒、巨细胞病毒、 肺炎克雷伯菌)和自身免疫性疾病时冷凝集素滴度均可升高。 同时，该试验的敏感性也只有50~60%,对于12岁以下的儿 童其敏感性则更差 补 体 结 合 试 验(CFT): 十几年前， CFT 仍是Mp 血清学试验的 标准方法，但越来越多的研究表明该方法的敏感性和特异性都 不够高。 CFT 所用的抗原为Mp 的氯仿-甲醇糖脂抽提物，它可 与人类、细菌及植物的某些抗原表位发生交叉反应(如脑膜炎 时， CFT 滴度可明显升高)。 CFT 测定的主要是IgM, 对IgG 不很敏感，导致其整体敏感性偏低。 7 间 接 血 凝 试 验(PHA): 将提纯的Mp 抗原连接到红细胞(禽类 或羊)上，与血清中的抗Mp抗体可发生凝集反应。该试验的敏 感性和特异性均明显优于CFT 。PHA 不能区分抗体的类型，因 此单份测定出现低滴度的抗体阳性结果并不能确定是既往感染 还是新近感染。最好能间隔2~3周再采取第2份血样进行测定， 观察抗体滴度是否有4 倍以上的增加(血清转化)。单次测定出 现高滴度抗体阳性(大于1:8)也有助于对Mp 新近感染的判断 明胶颗粒凝集试验 (PA): 其原理与间接血凝试验基本相同，只 是用人工合成的明胶颗粒取代了红细胞作为凝集试验的载体， 从而使结果判定更清晰，静置稳定性更好，非特异性反应大夫 减少，检测的敏感性也有了进一步提高(对IgM 和IgA 更敏感) 8 酶联免疫吸附试验 (ELISA): 是目前Mp 血清学试验中常用 的方法，可分开检测IgM、IgG 和IgA, 敏感性和特异性均能 达到较高的水平。虽然单次测定IgM ( 或IgA) 阳性即可基本 判定为Mp 的新近感染，但阴性时却无法排除感染的可能性。 IgG 一般须进行间隔2周以上的双份血清测定，有4倍以上滴度 上升时才能做出Mp 新近感染的诊断。因此，在ELISA 测定中 应强调同时检测IgG 和IgM ( 或IgA), 且最好能对间隔2周 以上的双份配对血清进行抗体转化情况的测定，从而做出明确 的诊断 金标快速检测：具有简便、快速的优点。但也同样应强调 IgG 和I gM 的同时检测。由于只能进行定性测定，无法观察血清转 化情况，限制了其在临床诊断中的价值 其它方法：间接免疫荧光试验 (IFA)、 乳胶凝集试验 (LA)、 免疫印迹测定 ( WB )、 黏附抑制试验、放射免疫沉淀试验、 补体介导的杀伤试验等 9 易炎支原体感染的直毒学检查试到 肺炎支原体抗丛检测试剂盒(被动凝集法) 产显标准编号：YZB/AP 1865 2005