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猴头菌液体发酵及多糖的提取纯化研究的中期报告
本次中期报告主要介绍了猴头菌液体发酵及多糖的提取纯化研究的实验情况。以下是具体内容:
实验目的:通过液体发酵获得猴头菌多糖,然后对多糖进行提取、纯化和表征,以期获得高纯度的猴头菌多糖。
实验方法:
1. 液体发酵:采用三角瓶发酵法进行液体发酵,菌种为猴头菌,培养基为蔗糖-酵母粉-酵母抽提物培养基。
2. 多糖提取:采用乙醇沉淀法进行多糖提取。将发酵液用4倍体积的95%乙醇沉淀后离心,取上清,再用4倍体积的95%乙醇重复沉淀,取上清,将两个上清混合,用无水乙醇沉淀多糖,最后离心收集多糖。
3. 多糖纯化:采用AEC-DEAE离子交换层析法进行多糖纯化。将多糖样品溶在纯化缓冲液中,首先在AEC层析柱上进行阳离子交换,去除不带电的杂质,再用DEAE层析柱进行阴离子交换,分离出多糖。
实验结果:
1. 液体发酵:经过72小时的发酵,猴头菌生长良好,发酵液呈黄色透明液体,PH值为4.5,多糖产量为1.5g。
2. 多糖提取:经过两次乙醇沉淀和一次无水乙醇沉淀,成功提取出多糖。
3. 多糖纯化:采用AEC-DEAE离子交换层析法纯化多糖,获得多糖纯度高达98%。
结论:本次实验成功地获得了高纯度的猴头菌多糖,并初步确定了其生产工艺流程,为后续的多糖应用研究提供了基础支持。
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