液相色谱―串联质谱法测定火锅食品中罂粟碱等非法添加剂含量的不确定度评定.docx

液相色谱―串联质谱法测定火锅食品中罂粟碱等非法添加 剂含量的不确定度评定 1 引言 罂粟壳是成熟罂粟果去籽后的部分，属于国家管制药 品，但因其具有调味的功能，所以被一些不法商贩用于火锅、 面汤、酸辣粉、卤制品等食品中。罂粟壳中主要成分有罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因等，长期食用容易上瘾， 过量摄入可能引起心律不齐，甚至导致死亡。因此，准确检测食品中罂粟碱等非法添加剂含量，对于维护人民身体健 康、打击非法添加现象具有重要的意义。测量不确定度表征合理地赋予被测量之值的分散性，对检测结果的可信性有着重要意义。 本文以罂粟碱为例对液相色谱一串联质谱法测定火锅食品中非法添加剂含量的不确定度进行了评定，计算了测定 结果的合成不确定度和扩展不确定度，为评价检测结果提供 了理论依据。 材料与方法 仪器与试剂 Dionex Ultimate 3000 高效液相色谱仪：TSQ QuantivaMS三重四级杆质谱仪（Thermo fisher）；配加热电喷雾离子源 （H-ESI）；XP204 型电子天平（METTLER TOLEDO）；超声波清洗机（德国 Elma-P120H）；高速离心机（德国 Sigma）； WH-861 涡旋混合器（南京诺泰施格科学仪器有限公司）；罂粟碱等非法添加剂混合标准溶液（罂粟碱浓度 10μ g/mL，安谱公司）；乙腈、甲醇、甲酸（色谱纯，美国天地有限公司）。 色谱柱：Phenomenex C18（4.6mm×100mm，2.6μ m）；流动相 A 为含 0.1%甲酸水溶液，流动相 B 为甲醇，梯度洗脱条件：0～2min：90%A；2～3min：90%A～10%A；3～7min： 10%A：7～8min：10%A～90%A：8～10min：90%A：流速 0.5m L/min，进样量 10μ L，柱温 35℃。 质谱条件：H-ESI；正离子模式；选择反应监测（SRM） 扫描模式；喷雾电压 3.5kV；毛细管温度 350℃，离子源温度 350℃，鞘气（N2）流速 4.58L/min，辅助气（N2）流速7.97L/min。 实验方法 称取样品 5g 于 50mL 聚乙烯离心管中，加入 5mL 水， 振?u 使分散均匀，加入 15mL 乙腈，涡旋振荡 1min，加入6g 无水硫酸镁门.5g 无水醋酸钠的混合粉末（Waters 公司），迅速振摇，涡旋振荡 1min，以 4000 转/分钟离心 5min。取上清液 1.5mL 于 DisQuE 的净化管（150mg 无水硫酸镁 /50mgPSA/50mg C18，Waters 公司），涡旋混合 1miD，以 10000 转/分钟离心 2min，移取上清液，0.22μ m 滤膜过滤，取滤液 待测。 数学模型 根据样品测试方法建立的不确定度评估模型如下： 式中：ω ――试样中罂粟碱的含量（μ g/kg）；C――试样溶液中罂粟碱的浓度（ng/mL）；V――定容体积（mL）； M――试样质量（g）。 不确定度的分析与评定 测量重复性引入的不确定度 Urel（X） 采用 A 类方法评定测量重复性引入的不确定度，评定结果已涵盖了各步骤的重复性及样品前处理中各因素的影响。 在相同的条件下，取一阳性样品采用相同的方法平行测 试 10 次，测试结果如表 1 所示：