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- 2023-11-13 发布于上海
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多角体蛋白融合的OPG在大肠杆菌和家蚕细胞中的表达与活性测定的中期报告
本报告介绍了多角体蛋白融合的OPG在大肠杆菌和家蚕细胞中的表达与活性测定的中期结果。OPG是一种重要的细胞因子,在骨代谢和免疫系统中发挥重要作用。由于OPG的活性和稳定性较差,因此需要寻找一种有效的表达和纯化方法。
我们选用了多角体蛋白融合技术来表达OPG,这种方法能够提高蛋白的稳定性和溶解度。我们将OPG基因插入到多角体蛋白大肠杆菌表达载体pET28a-MBP中,并通过IPTG诱导表达。通过SDS和Western Blot分析,我们发现OPG-MBP融合蛋白在大肠杆菌中表达成功,并且能够与抗-MBP抗体结合。
接下来,我们对OPG-MBP融合蛋白进行了纯化和活性检测。通过亲和层析和凝胶过滤层析纯化出OPG-MBP融合蛋白。通过成对的ELISA分析,我们发现OPG-MBP融合蛋白具有与OPG相似的生物活性。
此外,我们还对OPG-MBP融合蛋白在家蚕细胞中的表达进行了初步的研究。我们将OPG-MBP基因插入到家蚕细胞表达载体pIZ/V5-His中,并通过转染将其转化到家蚕卵巢细胞中。通过Western Blot分析,我们发现OPG-MBP融合蛋白在家蚕细胞中也表达成功。
综上所述,通过多角体蛋白融合技术,我们成功地表达和纯化了OPG-MBP融合蛋白,并且初步证明其具有生物活性。接下来,我们将继续深入研究OPG-
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