第一篇第四章动物细胞培养反应器详解演示文稿.pptVIP

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第一篇第四章动物细胞培养反应器详解演示文稿.ppt

第一篇第四章动物细胞培养反应器详解演示文稿 本文档共20页;当前第1页;编辑于星期三\9点12分 优选第一篇第四章动物细胞培养反应器 本文档共20页;当前第2页;编辑于星期三\9点12分 动物细胞培养方法 贴壁培养(单层细胞培养) 分散的细胞悬浮在培养瓶中很快(几十分钟至几小时)就贴附在瓶壁上, 称为细胞贴壁, 贴壁后的细胞形态形成多态性, 呈单层生长, 所以此法又叫单层细胞培养。 悬浮培养 细胞在培养器中自由悬浮生长的过程,不贴壁,主要用于悬浮型细胞培养,如淋巴细和肿瘤细胞的培养。 本文档共20页;当前第3页;编辑于星期三\9点12分 固定化培养 一种包埋培养。对两类细胞都适用,细胞生长密度高,抗剪切力和抗污染能力强。悬浮型细胞常用海藻酸钙包埋,贴壁型细胞常用胶原包埋。 动物细胞培养方法 本文档共20页;当前第4页;编辑于星期三\9点12分 动物细胞培养可生产的生物制品 1.病毒疫苗:口蹄疫(FMD)、狂犬疫苗等 2.非抗体免疫调节剂:干扰素(IFN)、白介素(IL)等 3.多肽生长因子:神经生长因子(NGF)、成纤维细胞生长因子(FGF) 4.酶:组织血纤维溶酶原激活剂(t-PA) 5.激素:红细胞生成素(EPO)、促黄体生成素(LH) 6.病毒杀虫剂 7.肿瘤特异性抗原:癌胚抗原(CEA) 8.单克隆抗体 9.皮肤重植 10.细胞 动物细胞培养技术的应用 本文档共20页;当前第5页;编辑于星期三\9点12分 动物细胞培养技术的应用 动物细胞培养生产生物制品工艺实例 1.组织纤溶酶激活剂生产工艺流程 细胞单层 细胞悬液 细胞培养物 培养 培养液 提取液 层析液 浓缩液 层析液 tPA成品 分散 分离 提取 层析纯化 浓缩 层析精制 冻干 2.抗HBsAS的单克隆抗体生产工艺流程 培养液 杂种细胞混合物 大鼠骨髓瘤+免疫大鼠脾淋巴细胞 融合 融合混合物 筛选 克隆化 杂交瘤克隆系 种质培养 细胞种质 扩大培养 分离 粗制McAb 精制 层析液 超虑 浓缩液 冻干 McAb精品 本文档共20页;当前第6页;编辑于星期三\9点12分 动物细胞培养的特点 1. 细胞生长缓慢,易受微生物污染,培养时需要抗生素; 2. 动物细胞较微生物大得多,无细胞壁,机械强度低,适应环境能力差; 3. 培养过程需氧量少,且不耐受强力通风与搅拌; 4. 在机体中,细胞相互粘连以集群形式存在; 5. 培养过程产物分布于细胞内外,成本高,产品价格昂贵; 6. 大规模培养时,不可套用微生物反应的经验; 7. 原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡。 动物细胞培养的特点 本文档共20页;当前第7页;编辑于星期三\9点12分 无论是贴壁细胞还是悬浮细胞,深层培养的操作方式可分 细胞培养的操作方式 分批式、流加式、半连续式、连续式和灌注式。 分批式操作 操作简单、是最常用的操作方式。分批式培养过程中,细胞的生长可分为延迟期、对数生长期、减速期、平稳期和衰退期 分批式培养细胞生长曲线 本文档共20页;当前第8页;编辑于星期三\9点12分 流加式操作 半连续式操作 细胞培养的操作方式 能够调节培养环境中营养物质的浓度。 连续操作 能提高细胞密度,应用于培养悬浮型细胞。 灌注培养 大大提高细胞密度,有助于产物的表达和纯化。 本文档共20页;当前第9页;编辑于星期三\9点12分 动物细胞培养反应器 本文档共20页;当前第10页;编辑于星期三\9点12分 动物细胞培养反应器 本文档共20页;当前第11页;编辑于星期三\9点12分 通气搅拌式细胞培养反应器 本文档共20页;当前第12页;编辑于星期三\9点12分 通气搅拌式细胞培养反应器 本文档共20页;当前第13页;编辑于星期三\9点12分 本文档共20页;当前第14页;编辑于星期三\9点12分

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