2种人工抗原的合成及多克隆抗体的制备.docxVIP

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  • 2023-11-21 发布于广东
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2种人工抗原的合成及多克隆抗体的制备.docx

2种人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 氨基溶胶(图1)属于硝基溶胶,常用于预防和控制家禽肠感染。据资料报道,呋喃唑酮具有较强的致畸、致癌、致突变等毒副作用,其在动物性食品中的残留直接威胁到人类身体健康。1995年,欧盟禁止呋喃唑酮用于食品动物,随后美国、日本、澳大利亚、中国等均取消呋喃唑酮在畜禽生产上的使用。但呋喃唑酮残留超标事件时有发生,因此很有必要建立一种快速筛选呋喃唑酮残留的方法。呋喃唑酮在动物体内很快代谢成3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ,图1),与组织结合的AOZ在体内滞留时间长,被视为残留标示物。检测AOZ时,往往先将AOZ从组织中解离出来,再与衍生试剂2-硝基苯甲醛发生衍生反应,生成3-(2-硝基苯亚甲基)-氨基-2-恶唑烷酮(NPAOZ),通过检测NPAOZ来达到检测AOZ的目的。目前检测AOZ残留的方法有LC-UV,LC-MS和LC-MS-MS,该类技术所需设备要求较高,不适合高通量样品筛选。酶联免疫吸附法(ELISA)利用特异性抗体,具有灵敏度高、特异性好、成本低、操作方便等特点,适于高通量样品筛选。欧盟Food BRAND已开展AOZ的ELISA方法研究,该方法是通过检测NPAOZ来计算AOZ的含量,国内尚未见相关报道。本实验合成了呋喃唑酮残留标示物AOZ,对呋喃唑酮人工抗原合成进行了详细研究,设计两种半抗原,采用戊二醛法和碳二亚胺法与载体蛋白相连,合成了AO

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