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2022/12/7 γ-干扰素释放试验在中国应用的建议中华医学会结核病学分会、《中华结核和呼吸杂志》编辑委员会(发布时间：2014-10) γ-干扰素释放试验在中国应用的建议 中华医学会结核病学分会、《中华结核和呼吸杂志》编辑委员会(发布时间：2014-10) γ-干扰素释放试验(interferon-γ release assays，IGRAs)是检测结核分枝杆菌(MTB)特异性抗原刺激T细胞产生的γ-干扰素，以判断是否存在MTB的感染。IGRAs可弥补PPD试验的不足，目前多个 国家已将其用于诊断MTB潜伏感染(latent tuberculosis infection，LTBI)，我国部分医院也已常规开展此项检测，且多家IGRAs试剂已经或即将进入临床应用。 LTBI是宿主感染MTB后的一种特殊状态，感染者体内的MTB处于持留状态，不能诊断为活动性结核病，但具有发展为活动性结核病的风险。对LTBI的高危人群进行早期诊断和适当干预，在结核病 控制中具有积极意义。PPD试验作为诊断MTB感染的传统方法，具有操作简便、成本低廉的特点，至今仍广泛使用，但该方法使用的PPD抗原成分复杂，易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌(nontu berculosis mycobacterium，NTM)的影响，特异度较低，且对人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足。研究结果提示，IGRAs诊断MTB感染的特异度高于PP D试验，但也有文献报道，特别是在中、低收入国家，IGRAs与PPD试验相比没有足够的优势。IGRAs技术要求高，操作程序复杂，样本检测时限短，难以实现高通量，价格昂贵。由于缺乏严谨、 大规模和前瞻性的人群研究数据，故IGRAs的应用范围及结果解读存在较大争议。为了指导IGRAs在我国的合理应用，中华医学会结核病学分会与《中华结核和呼吸杂志》编辑委员会组织有关专家 经过长时间的反复研讨，在借鉴世界卫生组织(WHO)关于中低收入国家IGRAs应用说明的基础上，结合我国IGRAs应用现状，提出以下建议。 一、IGRAs简介 1.IGRAs的原理和主要方法：受到MTB抗原刺激致敏的T细胞再次遇到同类抗原时可产生γ-干扰素，IGRAs通过检测全血或分离自全血的单核细胞在MTB特异性抗原刺激下产生的γ-干扰素，判断受 试者是否感染MTB。目前国际上较成熟的IGRAs有2种：(1)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测全血中致敏T细胞再次受到MTB特异性抗原刺激后释放的γ-干扰素水平，称之为全血检测或结核感染T 细胞免疫检测；(2)采用酶联免疫斑点技术(enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT)测定在MTB特异性抗原刺激下，外周血单个核细胞中能够释放γ-干扰素的效应T细胞数量，称之为细胞检 测或结核感染T细胞检测。上述2种检测方法的原理类似，检测技术和操作程序略有不同，均采用MTB的RD1区基因编码抗原多肽作为特异性抗原，主要有相对分子质量为6000的早期分泌抗原靶(E SAT6)和相对分子质量为10000的培养滤液蛋白(CFP-10)抗原或抗原多肽。有些产品在此基础上增加了TB7.7抗原多肽。我国目前生产或代理IGRAs试剂盒的多个厂家完成或正在进行注册审评，其 中部分产品已获准上市。 2.IGRAs的适应证和优缺点：经国家食品药品监督管理总局批准，目前IGRAs的使用范围是检测血液样本中效应T细胞产生γ-干扰素的能力，用于诊断MTB感染。适应证主要包括LTBI的诊断和活动 性结核病的辅助诊断。ESAT-6和CFP-10主要存在于MTB复合群，而在卡介苗和大多数NTM中缺失，因此IGRAs的特异度较好。但ESAT6和CFP-10也存在于少数几种NTM中，如堪萨斯分枝杆 菌、海分枝杆菌、苏尔加分枝杆菌、转黄分枝杆菌和胃分枝杆菌，故IGRAs阳性不能排除上述几种NTM感染的可能。由于ELISPOT技术是从单细胞水平进行检测，可及时捕获细胞周围分泌的细胞 因子，故敏感度更高。但在实际使用中发现，IGRAs在不同地区、不同人群中的特异度和敏感度均存在较大差异，在某些人群中并未显示其敏感度和特异度优于PPD试验。且IGRAs对实验技术和实 验条件要求较高，价格昂贵，样本检测时限短，难以实现高通量，因而限制了在中低收入国家的推广应用。此外，不同IGRAs产品使用的抗原、检测试剂、检测参数和界值设定等