第二章色谱法基本原理课件.pptxVIP

§ 2.1 概论 § 2.2 色谱分配平衡 § 2.3 塔板理论 § 2.4 速率理论 § 2.5 影响谱带扩宽的其他因素 § 2.6 分离度及其影响因素 § 2.7 分析时间的最佳化 第二章 色谱基本原理 1 2.1 概论 2.1.1 色谱基本流程 进样器 ↓ 流动相 → 流速控制与测量 → 色谱柱 数据记录与处理系统 检测器 → → 2 2.1.2 色谱流出曲线及常用的术语和参数 色谱流出曲线(色谱图) 指色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时 间的曲线图称色谱流出曲线。 3 2.1.2 色谱流出曲线及常用的术语和参数 (1)基线 ：实验条件下，只有纯流动相通过检测器 时的记录信号 基线稳定 基线漂移 基线(低频)噪声 基线(高频)噪声 4 (2)色谱带：组分在柱内的浓度分布构型 (3)色谱峰：组分通过检测器产生的响应信号 记录的微分曲线。 (4)峰高 ：色谱峰顶到基线的垂直距离 5 l用时间表示 保留时间 t R 调整保留时间 (4)保留值 ：组分在色谱床中的滞留情况 死时间 t M 6 保留体积 调整保留体积 校正到柱温的流动相体积流速(mL/min) l用体积表示 死体积 7 —室温下， 皂膜流量计测得的流速 —大气压(柱出口的压力) —室温时水的饱和水蒸气压 —柱温 —室温 8 柱内平均压力下的平均流速, j － 压力校正因子 ：柱内平均压力下的平均流速 乘以保留时间所得到的体积。 式中： 为大气压, 为柱前压力 校正保留体积 9 净保留体积: 比保留体积 :指 时每克固定液的净保留体积 为柱温， 为固定液重量 式中: 10 相对保留值r2,1 ：两个不同组分的调整保留值之比。 11 (6)区域宽度 :色谱峰的宽度 标准偏差 ：0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半 半峰宽 ： 峰底宽度: 12 2.2 色谱的平衡 2.2.1分配系数与柱温的关系 在一定温度下，分配体系达到平衡时，组 分在两相的浓度之比称为分配系数K 。 组分在固定相中的浓度 组分在流动相中的浓度 13 K由组分和两相的热力学性质决定，随柱温而变化。 当色谱体系和分离对象确定以后， K 只与柱温有关， 其关系式为 ： 相对于标准状态的自由能 气体常数 色谱柱柱温(k) 一般情况组分在固定相的 与 成反比。 为负值，则 14 2.2.2 分配比(分配容量、容量因子、容量比) 指在一定的柱温下，组分在两相达到分配 平衡时，分配在固定相和流动相的总量之比。 式中， 称为色谱体系相比( ) 15 注意 ： 1 是指真正参与组分在两相分配的那一部分有效体积 分配色谱— 固定液的体积 吸附色谱— 吸附剂表面积 离子交换色谱—离子交换剂的交换容量 排阻色谱— 多孔固定相孔容 2 为柱内流动相的体积(柱死体积) 流动流动相 停滞流动相 实际测定时包括了进样器，连接管，检测器的死体积。 16 对一定色谱柱，两相的体积比 一定，则 2.2.3 分离因子(选择比、溶剂效率) 17 当 时， ，组分不能分离。 主要由两相的性质决定。同时也会受柱温的影响。 与柱长、柱径、流动相速度、柱填充情况无关。 不同浓度溶液中溶质迁移所引起的自由能 组分1和组分2有： 两组分自由能变化的差值 变化，对 应为 18 分配系数随组分浓度变化的规律称 为分配等温线。典型的分配等温线有三种， 线性、凸型、凹型。 2.2.4 分配等温线 19 a b c k与C无关 C增大， K减小 C增大， K增大 20 中的分配。 组分在固定相时，迁移速度 组分在流动相时，迁移速度 所以，有保留组分谱带的迁移速度 2.2.5 基本保留方程式 组分在柱内的移动速度取决于组分在两相 21 设色谱柱长 对于溶质分子: 对于流动相分子: ( 可从色谱图直接测定) 22 若用保留体积 代替 ，则 基本保留方程式 因为： 所以 23 色谱基本保留方程式的物理意义 ① 组分的保留值取决于组分的K和色谱体 系的β, 色谱装置 (VM与Vs)一定时,相比 β一定,组分保留值取决于K(组分的本性 ),故可作为定性的依据 ② 因为保留值与β有关,装置改变时保留 值不同 S4 色谱流出曲线的意义： l色谱峰数=样品中组份的最少个数； l色谱保留值—— 定性依据； l色谱峰高或面积—— 定量依据； l色谱保留