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乌梢蛇蛇鳃中氨基酸含量测定 蛇是水生动物的黑眉蛇。e.kanat或omesart动物。有祛风,定惊,解毒,退翳功用,用于小儿惊风,抽搐痉挛,翳障,喉痹,疔肿,皮肤瘙痒。现有人用蛇蜕治疗脑囊虫病,还试用于治疗绒毛膜上皮细胞癌等。蛇蜕的主要组分是骨胶原、氨基酸、脂肪酸、甾醇和微量元素。目前普遍认为,氨基酸对人体的健康有着极其重要的生理意义,药物中的氨基酸对临床治疗疾病能够产生较大的影响。本试验研究乌梢蛇不同生长时期蛇蜕的氨基酸组成,为探讨乌梢蛇蛇蜕化学成分与乌梢蛇蛇蜕药效之间的关系,以及对乌梢蛇蛇蜕的选材提供参考依据。 1 材料和方法 1.1 样本来源 成蛇蛇蜕由黄山市蛇类科学研究所提供,幼蛇的3次蛇蜕由本课题组对刚孵化的幼蛇进行单独饲养至冬眠前所收集。全部蛇蜕经唐鑫生副教授鉴定。 1.2 氨基酸自动分析 每一批蛇蜕取2件标本,用少量洗洁精洗涤,自来水漂洗后,经去离子水反复冲洗4次(以上),各取其中段,剪碎,40℃真空烘干后混匀,从中准确称取50 mg,经6 mol·L-1盐酸水解后,采用日立835-50型氨基酸自动分析仪进行分析,其中色氨酸在水解过程中被破坏未能测出。 2 蛇蜕氨基酸资源 在所测定的不同生长时期乌梢蛇蛇蜕中的水解氨基酸除色氨酸水解破坏未能测出外,其他的L-型氨基酸均被测定,共测出16种(见表1),其中必需氨基酸6种,非必需氨基酸10种,含量较多的氨基酸为甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸、亮氨酸、酪氨酸、精氨酸和脯氨酸,其中含量最高的是甘氨酸,在幼蛇第1次蛇蜕中含量为11.64%,幼蛇第2次蛇蜕中含量为12.18%,幼蛇第3次蛇蜕中含量为11.37%,成蛇蛇蜕中含量为11.14%,最低的是组氨酸。蛇蜕中必需氨基酸含量占氨基酸总量的26.53%～29.80%。可见,所测得的氨基酸中,人体必需及半必需氨基酸含量匀较丰富。 其次,对本次所测定不同生长时期乌梢蛇蛇蜕的氨基酸含量进行对比,幼蛇蜕中必需氨基酸含量平均为21.26%,成蛇为16.33%。幼蛇蜕中氨基酸总量平均为74.71%,成蛇为61.53%。以上比较表明,乌梢蛇幼蛇蛇蜕的氨基酸含量高,而成蛇蛇蜕的氨基酸含量相对较低。 3 乌梢蛇蛇蜕可治肝活调营养成分丰富 本次所测定乌梢蛇蛇蜕中氨基酸含量与赵文静等所测乌梢蛇蛇干的氨基酸含量相比:乌梢蛇蛇蜕中甘氨酸、亮氨酸、酪氨酸、丝氨酸和脯氨酸的含量均高于乌梢蛇蛇干,其中以甘氨酸含量最高。甘氨酸是一种重要的氨基酸类药,现已被证明是中枢神经系统中惟一一种抑制性神经递质,通过激活突触后膜上的甘氨酸受体来发挥作用,起镇定剂的作用。乌梢蛇蛇蜕有祛风、定惊的功效,这可能与乌梢蛇蛇蜕中含有高达12.18%的甘氨酸有很大关系。另外,近年发现甘氨酸可在细胞、器官和整体水平防止各种有毒物质引起细胞损害,是一种较好的细胞、组织、器官保护剂;甘氨酸可改善肝脏的微循环,对肝脏有较好的保护作用,这些可能对乌梢蛇蛇蜕在治痔疮肿痛和各种虫毒等症及中医中认为蛇蜕入肝脾两经中起非常重要的治疗作用。亮氨酸是人体必需的3种支链氨基酸中的一种,对蛋白质代谢起主要调节作用,可减少高强度运动造成的蛋白质分解。酪氨酸可促进儿茶酚胺的形成,从而减轻应激而造成的影响。丝氨酸是一种生糖氨基酸,是用于治疗肝损伤患者的氨基酸混合液中的重要成分;另外,L-丝氨酸以特殊的湿润性,用于皮肤细胞的保护。乌梢蛇蛇蜕可治目生翳膜,痔疮肿痛,皮肤疥癣和各种虫毒及惊风癫痫等症,其医学作用机制可能与蛇蜕中含有丰富的甘氨酸、亮氨酸、酪氨酸、丝氨酸等药用氨基酸有密切关系,当然对乌梢蛇蛇蜕药效与其化学成分之间的关系尚需更深入的研究。其次,对乌梢蛇蛇蜕的选材从氨基酸含量分析看,以乌梢蛇幼蛇蛇蜕最为理想,这可能是由于幼蛇食欲旺盛,食物充足,生长速度最快所致。 [致谢]黄山市蛇科所黄接棠研究员提供实验帮助,胡建国、宗文明参加部分工作。