蛋白质与酶工程酶的提取分离和纯化.pptVIP

（2）原理： 酶的底物或竞争性抑制剂等通过共价键与惰性载体（如琼脂糖）相连接，形成亲和载体； 当含酶混合物通过亲和载体时，靶酶便与底物或竞争性抑制剂发生特异性结合，保留在柱子上，其它酶和杂蛋白则因“无处可依”而被洗出柱子 最后通过解吸附，将酶洗脱： *通过加入底物与亲和载体竞争酶分子 *也可改变pH或离子强度使结合的酶解吸 本文档共85页；当前第62页；编辑于星期三\17点48分 （3）特点 ①因其结合的专一性，所以产品的纯度高 ②步骤少 ③亲和载体的制备较难 ④造价高、规模小 本文档共85页；当前第63页；编辑于星期三\17点48分 四、酶的结晶 4-1 定义： 溶质以晶体形式从溶液中析出的过程，是酶分离纯化的手段之一 时间可以从几小时，几天，几个月，甚至几年。 为获得较高纯度的酶创造了条件。 为酶结构和功能的研究提供了适宜的样品； 本文档共85页；当前第64页；编辑于星期三\17点48分 Art or science？ 本文档共85页；当前第65页；编辑于星期三\17点48分 1、盐析结晶法： 在适当的温度和pH条件下，于接近饱和的酶液中缓慢增加某种中性盐的浓度，使酶的溶解度慢慢降低，达到稍微过饱和状态，而析出酶晶