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中药一审中生药的鉴别研究
红色又名血,主要产于湖北省恩施、宜昌、云阳等地。这是湖北西部常用的中药。它的原始植物是冬青科植物,带有冬青芽和芽的peduculosemiq,以叶和枝为基础。其性凉, 味苦、涩, 具有清热解毒、止血止痛的功效, 用于治疗外伤出血、风湿关节痛、跌打损伤和腰痛等症。现代研究表明一口红 (主要为具柄冬青的叶) 中含有大量的熊果酸, 且熊果酸具有抗炎、抗菌等多种生物活性。目前尚未见其生药鉴定方面的报道, 因此本文从一口红的性状特征及茎和叶的组织结构的显微特征等方面进行研究, 并对一口红主成分熊果酸进行TLC定性鉴别, 以期为制定其质量标准提供实验依据。
1 材料和机器
1.1 标本及其或供试
实验用一口红药材于2008年采自湖北省宣恩县珠山镇, 由笔者鉴定为冬青科植物具柄冬青Ilex pedunculosaMiq.的叶及嫩枝, 标本存放于湖北中医学院生药教研室。熊果酸对照品购于中国药品生物制品检验所 (批号110742-200516) 。所用试剂均为分析纯。
1.2 仪器
Olympus光学显微镜 (日本) ;KQ-500B型超声提取器;HH-S型水浴锅等。
2 方法和结果
2.1 小尺度、细胞薄、研磨法
叶片呈卵圆形或长椭圆形, 长4~9cm, 宽2~3cm。先端渐尖, 基部渐窄, 边缘中部以上常有疏细锯齿, 中脉在背面凸起, 稀有毛茸。叶上表面棕褐色, 下表面棕黄绿色。叶片薄, 革质, 易碎。叶柄纤细, 长1.5~2.5 cm, 上面具纵槽。嫩枝近圆柱形, 具纵棱线, 淡褐色。气微, 味微苦、涩。
2.2 家族史
2.2.1 异面叶海绵组织
上、下表皮均为1列细胞;主脉处细胞多呈类圆形, 非主脉处细胞多呈切向延长的长方形;外均被角质层。异面叶, 上表皮内有栅栏细胞2列, 不通过主脉;海绵组织由4~10余列薄壁细胞组成, 细胞形状不规则, 含草酸钙簇晶;主脉维管束处上、下表皮内均有厚角细胞。主脉维管束1个, 外韧型;木质部略呈半月形, 导管纵向排列;韧皮部较窄;木质部、韧皮部外均有纤维1~4列, 几乎连成环。见图1。
2.2.2 侧木栓层细胞形态
直径约3 mm, 呈圆形, 有脊突10余条。木栓层细胞2~5列;最外一层木栓层细胞呈类圆形, 其侧壁及外壁略增厚;内侧木栓层细胞呈切向延长的长方形。皮层较窄, 薄壁细胞约10余列, 多切向延长;皮层中间有石细胞和纤维组成的环带;皮层薄壁细胞含草酸钙簇晶和方晶。韧皮部窄, 细胞3~10列。形成层不甚明显。木质部较宽广, 主要由导管、木纤维和木射线组成;木射线较明显, 细胞多1~2列, 细胞径向延长;导管多1~2列。髓部细胞类圆形, 壁稍厚, 含草酸钙簇晶。见图2。
2.3 熊果肉tlc识别
3 熊《硫酸》的对照品溶液的制备
实验结果表明: (1) 一口红叶的主要显微特征是栅栏细胞2列, 不通过主脉;木质部、韧皮部外纤维几乎连成环。 (2) 一口红茎的主要显微特征是皮层中间有石细胞和纤维组成的环带;髓部细胞壁稍厚。 (3) TLC图中一口红的熊果酸斑点明显, 说明熊果酸是一口红主要成分之一, 提示一口红有较好的开发利用前景。
取本品粉末0.5g, 加甲醇50mL, 振摇, 冷浸24h, 滤过, 取续滤液浓缩至5mL, 作为供试品溶液。取熊果酸对照品, 加甲醇制成每1mL含1.105mg的溶液, 作为对照品溶液。照薄层色谱法 (2005年版中国药典一部附录ⅥB) 试验, 吸取上述供试品溶液20μL、对照品溶液1 0μL, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以氯仿-甲醇-甲酸 (20∶1∶0.3) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷10%硫酸-乙醇溶液, 在105℃烘约5min, 供试品色谱中, 在与对照品色谱相应的位置上显颜色相同的斑点。见图3。
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