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小麦条锈菌红色和白色夏孢子菌系白化的筛选 小麦锈病是我国小麦生产中的一个重要疾病之一。已有研究证实,我国小麦品种抗条锈性的“丧失”主要是由于毒性新小种的产生和发展所引起的。关于我国小麦条锈菌新小种产生的机制研究甚少。为此,作者于1985～1990年间,对小麦条锈菌的异核作用进行了较为系统的研究。本文报道该研究的部分结果。 1 菌株组合及检测 菌种供试菌种条中19,20,21,22,23,25,28,29等小种以及小麦条锈菌白化菌系制备的38个单孢菌系。 小麦品种新菌系的筛选和鉴定品种为小麦条锈菌生理小种的常规鉴别寄主,共22个品种。菌系的繁殖和混合接种品种为辉县红。 新菌系的筛选和鉴定将不同生理小种的单孢菌系与白化单孢菌系两两组合,共配成52个组合,混合后接种于共同感病品种辉县红,繁殖后在筛选品种上进行筛选。根据混合菌系在鉴别寄主上的反应型和夏孢子堆颜色,确定是否为新菌系。为进一步了解新菌系的毒性谱,将反应型特殊的白化新菌系转接于辉县红,扩大繁殖后回接鉴别寄主。新菌系筛选和鉴定均在14～16℃下进行,并以对应原始菌系为对照。 新菌系多核率测定夏孢子芽管细胞核的染色和观察按康振生等的荧光染色方法进行,芽管的观察数不少于450个。 新菌系细胞核游离的测定在继代转接过程中,染核测定各代夏孢子芽管的多核率,并将新菌系回接相应筛选品种,鉴定毒性特点。 2 结果 2.1 南大29基因回复突变株的分离和鉴定 在新菌系的筛选过程中,曾先后用各生理小种的38个单孢菌系,与白化菌系组成52个组合,分别混合接种小麦品种辉县红。在发病叶片上,黄白两种颜色的夏孢子堆相间排列。将收集的混合菌系分别在鉴别寄主上接种筛选,共接种筛选品种幼苗14 956株,仅在南大2419的一株幼苗上发现了反应型为3-4型的白色夏孢子堆病斑,由此繁殖建成南大2419菌系,其原始菌系分别为白化菌系BW-2和条中28-2.经回接证实,新菌系能正常感染南大2419,反应型为3-4型,而BW-2不能正常感染南大2419,反应为2+型。南大2419菌系、BW-2和条中28-2在部分鉴别寄主上的反应型见表1. 由表1可知,南大2419菌系能正常侵染品种南大2419、阿夫、丰产3号,而BW-2对这些品种均无毒性,并且在品种阿勃和北京8号上,两菌系的反应型仍不一致。这两菌系反应型的差异表明,夏孢子颜色与BW-2一致的南大2419菌系确为一新菌系。夏孢子芽管细胞核的荧光染色观察发现,南大2419菌系的多核率(3,4核率)为2,14,BW-2为0.81%,条中28-2为1.1%,新菌系的多核率明显高于两原始菌系。 2.2 不同接种生菌系夏制备夏芽孢杆菌多核率的变化 南大2419菌系在南大2419上继代转接过程中,用荧光染色法测定各代夏孢子芽管的多核率,并观察其毒性变化,得到以下结果:(1)新菌系夏孢子芽管的多核率不稳定,随着转接代数增加,夏孢子芽管多核率逐代下降,第五代以后,其多核率趋于稳定;(2)在新菌系多核率变化的过程中,南大2419菌系在南大2419上的毒性仍保持稳定,反应型一直为3-4型(表2)。 3 小麦条锈菌新菌系的鉴定 Little和Manners,Demitrier和Shelomove,Bartos等在锈菌方面的研究证实,经异核作用产生的新菌系,其毒性谱一般不同于两原始菌系,并且新菌系夏孢子芽管中多核率明显较两原始菌系高。本研究中由白化菌系BW-2和条中28-2混合接种后筛选出的南大2419菌系,其夏孢子颜色为白色,但毒性谱较BW-2广,又与条中28-2不同。该新菌系的多核率较两原始菌系要高,这些结果表明南大2419菌系是经异核作用生产的。作者在小麦条锈菌超微结构研究中,曾多次观察胞间菌丝间的融合现象,菌丝间的融合是细胞核交换的重要途径之一。本研究中见到,在小麦条锈菌黄、白菌系混合接种的叶片上,黄色、白色夏孢子堆相间排列的现象较为普遍,这为两菌系间的菌丝融合提供了可能性。关于异核作用的机制有待进一步研究,以便获得核交换的直接证据。 Nelson、郭爱国在小麦秆锈菌、小麦叶锈菌的异核作用研究中发现,新异核菌系往往是不稳定的,随转接代数增加,异核体的多核率和致病性逐渐下降。本研究发现的小麦条锈菌新异核菌系,尽管多核率随继代转接而下降,但其毒性始终保持稳定不变。这一结果表明,小麦条锈菌的异核菌系在核游离和相应寄主品种的筛选过程中,有可能发展成为一个毒性稳定的新菌系。 91届学生次仁卓参加部分工作,特此致谢。