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第卷第期中国食品学报

1910Ｖｏｌ．19Ｎｏ．10

２０19年10月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙOct．２０19

基于PacBioSMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价

边燕飞席晓霞郑艺侯强川孙天松孙志宏*

（内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室

农业部奶制品加工重点实验室呼和浩特010018）

摘要目的：婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活，然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养

技术只能对食品基质中活菌进行检测，无法全面评估污染微生物组成，而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配

方奶粉加工过程中污染微生物进行全面客观的评价。方法：采集6份婴幼儿配方奶粉，使用细菌纯培养、单分子

实时测序技术（PacBioSMRT）和微滴式数字PCR（ddPCR）联用技术对其污染微生物组成进行评价。结果：采用

纯培养技术在样品中均未检测到大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌和芽孢。使用PacBioSMRT

测序技术，在婴幼儿配方奶粉中共鉴定出14个细菌门、138个细菌属和255个细菌种。其中6份样品均存在过

嗜冷菌蜡样芽孢杆菌，其平均相对含量高达23.54%，这一灭活的细菌也会影响产品货架期。此外，在IF3、IF4、

和样品中，检测到相对含量较低的致病菌大肠杆菌，其相对含量分别为，，和。

IF5IF60.06%0.01%0.15%0.05%

采用ddPCR技术对SMRT测序方法检测到的致病菌蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌进行定量分析，发现每克奶粉样

品中蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌的平均拷贝数取对数后分别为5.45和4.89。结论：在6份婴幼儿配方奶粉中均

未检出致病菌，符合食品安全国家标准，然而奶粉中被灭活的蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌可能增加产品腐败的风

险，影响产品的货架期。本研究结合多个技术全面评价婴幼儿配方奶粉的微生物污染情况，初步建立婴幼儿配

方奶粉的微生物检测技术。

关键词婴幼儿配方奶粉；污染微生物；纯培养；ddPCR；PacBioSMRT测序

文章编号（）：

1009-7848201910-0212-09doi10.16429/j.1009-7848.2019.10.026

作为母乳不足时的替代品，婴幼儿配方奶粉和安全的重要因素，特别是沙门氏菌和阪崎肠杆

在牛乳或豆乳的基础上，调整和强化蛋白质、脂菌等，能导致新生儿脑膜炎和坏死性肠炎等疾病

肪、维生素等主要营养素，从而适合不同阶段婴幼的发生[2-3]。虽然奶粉加工过程中的热处理工艺可

儿生长和营养的需求。我国是世界第二大婴幼儿将大量微生物灭活使其符合产品要求，但微生物

配方奶粉消费市场，仅年月，我国进口婴所产生的耐热脂肪酶和蛋白酶仍具有活性，能够

20171

幼儿配方奶粉15091t，价值2.16亿美元[1]。由于降低奶粉溶解度并使之产生异味[4-5]。此外，亦有研

婴幼儿配方奶粉使用人群的特殊性，所以其质量究指出许多病原性细菌在死亡裂解后会释放出大

安全监控备受关注。随着婴幼儿配