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*(四)半乳糖血症1、概念:半乳糖血症是机体不能转化利用半乳糖及其中间代谢产物的一种常染色体隐性遗传病,主要特征为血和尿中半乳糖增高。2、生化缺陷:酶的缺陷半乳糖半乳糖-1-磷酸葡萄糖-1-磷酸UDPGUDP-半乳糖葡萄糖-6-磷酸半乳糖激酶半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶(最常见)UDP-半乳糖-4-差向酶临床表现:酶缺乏导致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉积在肝脏、肾脑、眼晶状体和红细胞中,引起相应的病变。代谢过程:第30页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三*第二节体液葡萄糖测定血液标本的采集与处理:标本采集:空腹静脉血,血清或血浆,抗凝剂选择草酸钾-氟化钠抗凝剂标本处理:1小时内分离血清或血浆(血糖在室温下以每小时5%的速度在下降),如不能及时检测要分离后放置2-8度冰霜保存一、血糖测定测定方法无机化学法有机化学法酶法第31页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三*(一)无机化学法:Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性(二)有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等Cu2+OH-Cu+Glu磷钼酸显色邻甲苯胺+Glu葡萄糖基胺希夫氏碱蓝绿色化合物缩合脱水分子重排特异性差干扰因素多(三)酶法(1)己糖激酶法(HK)(2)葡萄糖氧化酶法(GOD法)(3)葡萄糖脱氢酶法(GDH)第32页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三*
葡萄糖+ATP己糖激酶葡萄糖-6-磷酸+ADP
葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH
NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。原理:1、己糖激酶法(HK法)
第33页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三评价本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,不受溶血、脂血、黄疸、尿酸、维生素C、肝素、EDTA等干扰,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法,试剂较贵。第34页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三*2、葡萄糖氧化酶法(GOD)分为质谱法(速率法)、比色法原理:葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸内酯+H2O2
质谱分析法是用氧电极监测溶液中氧的消耗量,氧消耗量与葡萄糖浓度成正比2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物+H2O+O2
比色分析法是与过氧化物酶(POD)偶联,将过氧化氢分解为水和氧,同时使色素原性氧受休4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应,颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比第35页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三评价特异性较低,一些还原性物质如尿酸、VC、胆红素、溶血、GSH等可消耗过氧化氢,使结果偏低,操作简单,准确度与精确度都能达到临床要求,线性范围较好,适用于常规检验,是卫生部临床检验中心推荐方法。第36页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三*二、血糖测定的临床意义(一)生理性高血糖见于情绪激动时交感神经兴奋促使肾上腺素等分泌增加,也可见于一次性食入大量糖。(二)病理性高血糖1.糖尿病血糖测定是糖尿病最简单的筛查试验糖尿病治疗效果评价血糖水平监控有利于糖尿病患者调整饮食摄入量和胰岛素注射量,对降低其长期并发症有积极作用。2.内分泌腺功能障碍甲状腺功能、肾上腺皮质及髓质功能亢进等引起的升高血糖的激素分泌过多出现高血糖。第37页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三3.应激性高血糖如颅内压增高。4.脱水引起的高血糖呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。5.严重的肝病,使葡萄糖不能转化为肝糖原。6.胰腺病变第38页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三(三)血糖降低:1.生理性:见于饥饿、剧烈运动等2.病理性:(1)胰岛β细胞增生、肿瘤引起胰岛素分泌过多(2)对抗胰岛素分泌不足(3)严重肝病使肝的异生作用降低或肝糖原储存缺乏药物影响:第39页,讲稿共59页,2023年5月2日,星期三*葡萄糖耐量试验概念是一种葡萄
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