化学品 嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验 编制说明.docx

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《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》

编制说明

（征求意见稿）

一、工作简况

（一）任务来源

根据国标委发【2022】22号文件《国家标准化管理委员会关于下达2022年第二批推荐性国家标准计划及相关标准外文版计划的通知》，国家标准计划《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》（计划号T-469），由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251）提出并归口，由中国地质大学（武

汉）组织起草。

（二）协作单位

协作单位包括广东省微生物研究所、中国检验检疫科学研究院、中国科学院

生态环境研究中心。

（三）工作过程

本国家标准计划经国家标准化管理委员会批准后，主要起草单位中国地质大

学（武汉）开展的工作如下：

1、文本起草

在接到标准编制任务后，中国地质大学（武汉）组织成立了标准起草工作组。本小组在前期开展了大量关于化学品-嗜热四膜虫毒性测试方法的标准化实验操作程序和化学品毒性分级技术的研究工作，构建了四膜虫的日常培养体系，建立了四膜虫培养、保种、传代等操作的标准化程序；开展了38种化学品的毒性测试，构建了基于嗜热四膜虫的化学品毒性测试体系，确定毒性测试时间为12小时或者18小时最佳，毒性终点包括种群密度和相对种群活力；开展了大型溞和人肝癌细胞系（HepG2）急性毒性测试工作，并与四膜虫的毒性数据进行了对比，发现针对不同的化学品，四膜虫普遍比HepG2敏感，而大型溞和四膜虫的敏感

性排序不尽相同，但是基于四膜虫的化学品毒性测试方法具有更高的通量和较好

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的可操作性和重复性。因此，四膜虫在化学品毒性测试中表现出明显的优势。

基于以上的研究工作，2022年11月-2023年11月，标准起草小组通过汇总相关资料及检测数据，整理了嗜热四膜虫的培养、保种、传代、暴露等操作的标准化程序以及相应的毒性测试技术，并选择五家实验室对一种化学品进行了对比试验，评价了不同试验室间试验方法的可行性及试验结果的重现性。最终形成了

标准编写的主要思路和技术内容，完成了标准征求意见稿。

二、国家标准编制原则、主要内容及其确定依据，修订国家标准

时，还包括修订前后技术内容的对比

（一）编制原则

严格按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求制定该项国家标准。标准的编写严格遵循相关规范及相关法规的要求。本着科学性的原则，标准编制工作小组建立了嗜热四膜虫的培养、保种、传代、暴露等操作的标准化程序以及相应的毒性测试技术，并开展了嗜热四膜虫的适用性和敏感性验证的标准化研究，并以此构成了本标准内容的关键依

据。该标准填补了国内利用低等原生动物嗜热四膜虫进行化学品毒性测试的标准

空白。

（二）主要内容

本标准主要内容包括前言、范围、规范性引用文件、术语和定义、受试物信息、试验原理、参比物质、试验系统、限度试验、质量控制、数据统计和附录。

其中：

术语和定义——确定了本标准涉及的术语和定义；

受试物信息——规定了进行《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》有关

受试物基本理化性质等方面的必备资料；

试验原理——介绍了《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》的基本原理；

参比物质——介绍了《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》推荐使用的

参比物质最大试验浓度及其对四膜虫种群密度和相对种群活性的EC50参考范围；

试验系统——介绍了《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》有关的仪器

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设备、材料试剂、受试生物、试验溶液、预试验和正式试验程序；

限度试验——介绍了限度试验的试验方法；

质量控制——规定了《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》受试生物的

质量控制和检测质量控制的要求；

数据统计——介绍了《化学品嗜热四膜虫多代繁殖毒性试验》的指标计算、

数据记录、统计分析和试验报告方面的要求；

附录A（资料性）四膜虫时间-繁殖代际参考表——介绍了培养至不同时间

点四膜虫的种群数量和繁殖代际的参考数据；

附录B（规范性）四膜虫的实验室维护及培养方法实施指南——概述了四膜

虫在实验室条件下的具体规范性培养方法；

附录C（资料性）四膜虫暴露试验24孔板设置推荐方案——推荐了在24孔

板中受试物的暴露方案；

附录D（资料性）四膜虫种群密度检测相关参数设置推荐方案——推荐了全

自动细胞计数仪对四膜虫识别的参数设置条件；

附录E（资料性）四膜虫相对种群检测96孔板设置推荐方案——推荐了在

96孔板中四膜虫相对种群活力检测的受试物暴露方案。

（三）确定依据

本标准为我国首次制订，标准文本中所包含的前言、范围、规范性引用文件、术语和定义、受试物信息、试验原理、参比物质、试验系统、预实验、质量控制、数据统计和附录均按