化学品 稀有鮈鲫胚胎急性毒性试验 征求意见稿.docx

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GB/T××××—××××

化学品稀有鮈鲫胚胎急性毒性试验

1范围

本文件规定了化学品对稀有鮈鲫（Gobiocyprisrarus）胚胎急性毒性试验的受试物所需信息、试验原理、仪器设备、试验系统、试验程序、质量控制、数据与报告。

本文件适用于测试化学品对稀有鮈鲫（Gobiocyprisrarus）胚胎的急性毒性效应。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T27861化学品鱼类急性毒性试验

3术语和定义

GB/T27861界定的及以下术语和定义适用于本文件。

3.1静态试验statictest

以整个试验过程中试验介质不更换、不流动的方式进行的试验。

[来源：GB/T27861-2011，2.1]

3.2半静态试验semi-statictest

以定期（如24h）更换试验介质的方式进行的试验。

[来源：GB/T27861-2011，2.2]

3.3流水式试验flow-throughtest

以整个试验过程中试验介质自动、持续地被更换的方式进行的试验。

[来源：GB/T27861-2011，2.3]

3.4半数致死浓度medianlethalconcentration（LC50）

引起50%的受试鱼卵死亡的受试物浓度，以LC50表示。

[来源：GB/T27861-2011，2.4]

3.5板内质控internalplatecontrol

试验过程中用于验证24孔板的潜在的污染风险，包括任何可能影响试验结果的板效应（如温度梯度）而加入试验用水的一定数量的孔。

4受试物所需信息

受试物所需信息包括：

a)中英文名称；

b)CAS号；

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c)结构式；

d)纯度；

e)水溶解度；

f)蒸气压；

g)分子量；

h)在水中和光照条件下的稳定性；

i)pKa值；

j)水溶液中的定量分析方法；

k)正辛醇-水的分配系数（Kow）。

5试验原理

将新受精的稀有鮈鲫胚胎（Gobiocyprisrarus）暴露于一定浓度范围的受试物水溶液中，在静态、半静态或流水式试验系统中进行试验，观测96h，每24h记录卵凝结、体节缺失、尾部未分离、无心跳，并根据上述4个死亡表征中观察到的任何的一个确定半数致死浓度（LC50）。

6设备与材料

6.1仪器设备

仪器设备包括：

a)体视显微镜（至少可放大倍数为80倍）；

b)培养箱或温控室（温度可调至（26±1）℃);

c)分析天平（分度值为0.0001g）；

d)适用于流水式的连续分配和稀释系统；

e)溶解氧测定仪（可用于微孔板单孔测定）；

f)水硬度计；

g)pH计；

h)电导率仪。

6.2材料

材料包括：

a)化学惰性材料制成的鱼缸，其容积应适于推荐的承载量（见7.2.2）；

b)玻璃或聚苯乙烯材质的试验容器（如板高度约为20mm的标准24孔板，每孔体积2.5mL~3mL）；

c)用于覆盖24孔板的盖子或膜（惰性材料制成）；

d)产卵网箱：包含产卵箱、网架（孔径大小为（2±0.5）mm，用于保护鱼卵产出后不被成鱼捕食）以及产卵基质（如仿生植物），均由化学惰性材料制成；

e)用于收集鱼卵的宽口吸液管。

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7试验系统

7.1试验方式的选择

在试验之前，应根据受试物在水中的溶解度和化学稳定性确定合适的试验方式（静态试验、半静态试验、流水式试验），然后选定需用的容器和装置。半静态试验方式和流水式试验方式的选择见7.6.2和7.6.3。

7.2稀有鮈鲫

7.2.1亲鱼选择

挑选来源明确，有良好受精率记录的稀有鮈鲫用作产卵亲鱼，鱼龄在6个月~24个月之间。产卵前，亲鱼无肉眼可观察的感染或疾病，且2个月以上未经过任何药物（如急性或预防性药物等）处理。

7.2.2亲鱼驯养条件

亲鱼推荐的驯养承载量为1尾/升水。亲鱼宜在养鱼场和实验室条件（pH值为6.5~8.5；温度为（26±1）℃;每天12h~16h光照，10μE/m2/s~20μE/m2/s，540lux~1080lux；溶解氧浓度不低于饱和溶解氧浓度的80％）下驯化和饲养，驯养时间至少为2个月。

7.2.3产卵

试验用鱼卵可通过分组产卵（单独产卵箱）或集中产卵（驯养鱼缸）获得。分组产卵时，可在试验前一天将数对亲鱼（雌雄数