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化学品丽斑麻蜥急性经口毒性试验
1范围
本文件规定了化学品对丽斑麻蜥急性经口毒性试验的测定方法,包括试验的材料、条件、
操作、质量控制、数据处理、试验报告等的基本要求。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1半数致死剂量medianlethaldose
在急性经口毒性试验中,引起50%的供试生物死亡时的供试物剂量,用LD50(mg/kg
体重)表示。
2.2急性毒性acutetoxicity
是指生物体短时间(天)暴露于某种化学物质中产生的明显不良反应。在本试验中,丽
斑麻蜥急性经口毒性用半数致死剂量(LD)来表示,即在特定时间内(7d)导致50%数量的
50
供试蜥蜴死亡的供试物浓度。
2.3供试物testsubstances
试验中需要测试的物质。
2.4化学品chemicals
化学品是指各种元素组成的纯净物和混合物,无论是天然的还是人造的。
3方法原理
将不同浓度的供试物以一次经口灌注的方法暴露给丽斑麻蜥,以7d为一试验周期,记
录丽斑麻蜥的死亡情况,确定50%试验丽斑麻蜥死亡时的供试物剂量,用LD(mg/kg体重)
50
表示。
4试剂和材料
4.1供试生物
试验应选择同一种群、体长、体重和年龄相似的丽斑麻蜥(Eremiasargus)成年蜥蜴。
试验用丽斑麻蜥体重变异系数不超过平均体重的20%。试验前至少需要驯养7d,驯养条件
和照明条件与试验时的条件一致。驯养期间死亡率小于5%,且生长状态符合物种生长规律
1
视为健康良好,可用于后续试验。雌性丽斑麻蜥用于试验不能在其繁殖期。丽斑麻蜥驯养环
境参数见附录A。
4.2试剂
丽斑麻蜥的饮水可使用自来水。
配置不同浓度供试物溶液过程中的溶剂一般选择水(GB/T6682-2008规定的实验室一
级用水)或者食用油(例如玉米油)。试验用水的pH值应为6.5-8.5。试验期间水质保持恒
定。对于难溶于水或者油的供试物,可使用少量对丽斑麻蜥毒性小的有机溶剂助溶,例如乙
醇,二甲基亚砜等,其中有机溶剂用量一般不得超过0.1mL/L(0.1%),用前应了解溶剂的毒
理学特性。若助溶剂仍然无法满足溶解要求,可将供试物研磨成粉末,用水或者食用油配制
成悬浮液。
4.3饲喂材料
驯养和试验期间可用黄粉虫幼虫(TenebriomolitorL.)饲喂蜥蜴。
5仪器和设备
5.1试验容器
选择合适的容器进行试验,每个容器应容纳10只蜥蜴,可选择在30cm×30cm×20
cm的玻璃缸中进行。试验前应该彻底清洗,干燥后备用。
5.2仪器设备
量筒、容量瓶、小烧杯、分析天平、温湿度仪、微量进样针。
6样品制备
将一定量的供试物溶于一定体积溶剂中配制贮备液。贮备液应当天配制,对于化学性质
较稳定的物质,可配制供两天以上使用的溶液,配好后4℃保存。对于水溶解度低的物质,
可使用超声波分散混匀,也可使用少量有机助溶剂(助溶剂用量一般不超过0.1mL/L)。贮
备液的配制推荐使用机械方式(如搅拌或超声),使供试物在溶剂中进行简单的混合或搅动。
通过稀释贮备液来配制所选定浓度的试验溶液。
7试验步骤
7.1试验条件
试验温度控制在26°C—30°C,湿度控制在50%—70%,光暗比为14h:10h的环境中进
2
行。
饲养:试验开始24h前停止喂食,仅供清水,实验开始后正常饲喂面包虫。
7.2预试验
正式试验前先进行预实验,按正式试验的条件,以较大的间距设置4~5个浓度组,求
出供试物对供试蜥蜴的最低全致死浓度和最高全存活浓度,在此范围内设置正式试验的浓度。
7.3正式试验
根据预试验确定的浓度范围按一定间距设置5~7个剂量组,使死亡率分布在0%-100%
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